Введение
1. Обзор литературы 10
1.1. Клеточные культуры как модель экспериментальной онкологии 10
1.2. Разработка адресованных противоопухолевых препаратов 13
1.2.1. Создание новых противоопухолевых препаратов, влияющих на передачу митогенных сигналов 16
1.2.2. Молекулярные мишени для антиангиогенной терапии 20
1.2.3. Теломераза - потенциальная мишень противоопухолевой терапии 22
1.2.4. Противоопухолевые препараты - индукторы апоптоза 25
1.3. Тритерпеновые соединения 33
1.3.1. Глицирризиновая кислота 36
Противоопухолевая активность 38
1.3.2. Бетулин, бетулиновая кислота 39
Противоопухолевая активность 40
2. Материалы и методы 44
2.1. Материалы 44
2.1.1. Реактивы, используемые в работе 44
2.1.2. Исследуемые соединения 44
2.1.3. Клеточные линии 46
2.1.4. Олигодезоксирибонуклеотиды 46
2.1.5. Буферные растворы 47
2.2. Методы 47
2.2.1. Исследование цитотоксической активности соединений в опухолевых клетках в культуре (МТТ-тест) 47
2.2.2. Анализ апоптоза методом проточной цитометрии 49
2.2.3. Выделение суммарной клеточной РНК 49
2.2.4. Определение концентрации РНК в образце 50
2.2.5. Реакция обратной транскрипции 50
2.2.6. Полимеразная цепная реакция 51
2.2.7. Анализ продуктов ПЦР 52
2.2.8. Флуоресцентная гибридизация in situ с последующим анализом на проточном цитометре (flow-FISH) 52
2.2.9. Статистическая обработка данных 53
3. Результаты и их обсуждение 54
3.1. Исследование цитотоксической активности производных высших тритерпенов in vitro 54
3.1.1. Исследование цитотоксической активности производных бетулина in vitro 54
3.1.2. Исследование цитотоксической активности производных глицирризиновой кислоты in vitro 58
3.2. Исследование способности тритерпенов вызывать апоптоз в опухолевых клетках in vitro 61
3.3. Изучение молекулярных механизмов противоопухолевого действия производных тритерпеновых соединений 68
3.3.1. Исследование влияния производных тритерпенов на экспрессию гена ВЫ-2 в опухолевых клетках 69
3.3.2. Исследование влияния производных тритерпенов на экспрессию гена Cyclin D1 в опухолевых клетках 72
3.3.3. Исследование влияния производных тритерпенов на экспрессию гена hTERT в опухолевых клетках 75
Заключение 80
Выводы 85
Список литературы
