Введение
I. Введение 5
П. CLASS Обзор литератур CLASS ы 10
III. Материалы и методы 39
1. Материалы 39
2. Методы 41
2.1. Получение экстрактов белков мозга 41
2.2. Выделение ГДГ из мозга человека 41
2.3. Гидрофобная хроматография 42
2.4. Ионообменная хроматография 42
2.5. Аффинная хроматография 43
2.6. Адсорбционная хроматография 43
2.7. Хранение очищенных ферментов 44
2.8. Выделение тромбоцитов 44
2.9. Получение экстрактов белков тромбоцитов 44
2.10. Определение концентрации белка 45
2.11. Определение ферментативной активности ГДГ 45
2.12. Определение кинетических параметров изоформ ГДГ 45
2.13. Электрофорез в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия (ДС-Ыа-ПААГ) 46
2.14. Двумерный электрофорез 46
2.15. Вестерн-иммуноблоттинг с хемилюминесцентным усилением сигнала 47
2.16. Статистическая оценка данных 48
2.17. Получение антисывороток и их тестирование 48
IV. Результаты 49
1. Выделение ГДГ из мозга человека 49
2. Изучение физико-химических свойств изоферментов ГДГ 58
2.1 Определение молекулярной массы и изоэлектрической точки ГДГІ, ГДГИ и ГДГШ 58
2.2. Изучение гидрофобности ГДГ 61
2.3. Изучение кинетических параметров изоформ ГДГ 61
2.4. Изучение температурной зависимости изоформ ГДГ 68
3. Изучение иммунохимических свойств изоформ ГДГ 69
3.1. Получение специфичных антител 69
3.2. Определение органо- и видоспецифичности изоформ ГДГ 71
4. Сравнительное изучение ферментативной активности и содержания (по иммунореактивности) ГДГ в мозге лиц контрольной группы и при шизофрении 74
4.1. Изучение ферментативной активности ГДГ 74
4.2. Изучение содержания (по иммунореактивности) изоформ ГДГ 74
5. Сравнительное изучение содержания (по иммунореактивности) ГДГ в
тромбоцитах лиц контрольной группы и при шизофрении 80
5.1. Выявление изоформ ГДГ в тромбоцитах крови человека 80
5.2. Сравнительное изучение содержания ГДГ в тромбоцитах в контрольной группе и при шизофрении 81
V. Обсуждение 82
Vi. Выводы 94
Vii. Список литературы 96
