Введение
ГЛАВА I. Обзор литературы 11
1.1.. Молекулярная организация и генетическая активность хроматина 11
1.2. ДНК - связанные липиды 13
1.2.1 Взаимодействия липид - ДНК и липид-хроматин (хромосома) 20
1.3. Влияние липидов на генетические процессы 25
1.3.1. Влияние липидов на репликацию ДНК 28
1.3.2. Влияние липидов на транскрипцию 33
1 А. Механизм изменения состава липидов в ядре 35
1.5. Особенности строения и регуляции генов раннего ответа типа с- 38
fas, c-jim, р53
ГЛАВА II. Материалы и методы исследования 46
2.1.Объект исследования 46
2.2; Проведение частичной гепатэктомии [Higgins G.M., Anderson R.M.] 46
2.3.Методика выделения ядер 48
2.4.Фракционирование хроматина 48
2.5.Определение белка [Бредфорд М.М.] 49
2.6.Электрофорез белка по [Laemli U.K.] 50
2.7. Спектрофотометрическое определения ДНК и РНК 51
2.8.Определение содержания ДНК с дифениламином 51
2.9.Выделение ДНК 52
2.10,Постановка ПЦР-амплификация участка ДНК 53
2.11. Выделени е РНК 55
2.12. Амплификация генов раннего ответа с применен иелі обратной транскрипции 56
2.13. Электрофорез ДНК в агарозном геле, 58
2.14. Определение содержания РНК с орцином 58
2.15. Экстракция липидов [Bligh E.G., Dyer W.J.] 59
2.16, Приготовление тонких слоев силикагеля 59
2.17.Фракционирование липидов в тонких слоях силикагеля 60
2.18. Обнаружение и идентификация липидов на хроматограмме 60
2.19. Количественное определение фосфолипидов [Vaskovsky V.E., Kostetsky.E.Y.].
2.20. Количественное определение нейтральных липидов 63
2.21.ТБК-ТЄСТ 63
2.22.Определение диеновых и триеновых коныогатов 64
2.23.Молекулярное моделирование взаимодействия липидов с ДНК 64
2.24. Статистическая обработка 65
ГЛАВА III. Результаты и обсуждение 66
3.1. Активность генетических процессов в хроматине, различающемся связью прикрепления к ядерному матриксу, в печени мышей после частичной гепатэктомии 66
3.2. Особенности спектра липидов фракций хроматине в норме 79
3.3. Особенности перестройки спектра липидов во фракциях хроматина печени после частичной гепатэктомии 85
3.4; Перекисное окисление липидов во фракциях хроматина клеток печени в динамике регенерационного процесса 96
3.5. Моделирование методом молекулярной механики взаимодействий ДНК-липид 104
Заключение 114
Выводы 115
Список используемой литературы
