Введение
1. Литературный обзор 10
1.1 Основные виды анатидиабетических средств 10
1.1.1. Инсулин. Общая характеристика 10
1.1.1.1. Строение инсулина 11
1.1.1.2. Способы получения 11
1.1.1.3. Физикохимические свойства инсулина 16
1.1.1.4. Лекарственные препараты 19
1.1.2. Модифицированные аналоги инсулина 20
1.1.2.1. Инсулиноподобные аналоги 21
1.1.2.2. Химически модифицированные инсулины 23
1.1.2.2.1. Пэгилированные инсулины 23
1.1.2.2.2. Гликозилированные инсулины 24
1.1.2.2.3. Ацилированные инсулины - 28
1.2. Методы исследования и анализа инсулина и его модофицированных аналогов -30
1.2.1. Методы разделения и определения места присоединения модифицирующего агента 30
1.2.2. Методы определения первичной структурыинсулина и его аналогов 39
1.2.2.1. Определение N-концевых аминокислоти последовательностей 41
1.2.2.2. Опеделение С-концевых аминокислот 43
1.2.2.3. Масс-спектрометрическое секвенирование 45
2. Экспериментальная часть 50
2.1. Реактивы и материалы 50
2.2. Приготовление рабочих растворов 51
2.3. Приборы и оборудование 52
2.4. Общая методология работы 53
2.4.1. Анализ инсулина, дисахаридилинсулина и ПСА-инсулина методами ОФ ВЭЖХ и масс-спектрометрии 53
2.4.2. Анализ инсулина, Lys-Pro-инсулина и Asp-инсулина методами ОФ ВЭЖХ и масс-спектрометрии58
3. Результаты и обсуждения 62
3.1. Химически модифицированные инсулины 62
3.1.1. Анализ дисахаридилинсулина 63
3.1.2. Анализ полисиалированного инсулина 72
3.2. Инсулиноподобные аналоги 79
Выводы 95
Список литературы 96
