Введение
1. Обзор литературы 14
1.1. Ризобактерии рода Pseiidomonas. Функционирование в системе растения - фитопатогены 14
1.1.1. Антагонистическая активность PGPR Pseiidomonas 15
1.1.2. Метаболиты псевдомонад - агентов биологического контроля фитопатогенных грибов
1.1.2.1. Синтез антибиотиков 1 8
1.1.2.2. Продукция сидерофоров
1.1.3. Синтез фитогормонов PGPR Pseiidomonas 35
1.1.4. Биопрепараты на основе бактерий рода Pseiidomonas
1.2. Свойства метаболитов бактерий рода Pseiidomonas, обладающих фунгицидиой активностью 47
1.3. Механизмы комплексообразования метаболитов бактерий с органическими соединениями и ионами металлов 55
1.4. Оптимизация условий культивирования бактерий рода Pseiidomonas
1.4.1. Условия культивирования, питательные среды для бактерий рода Pseiidomonas - продуцентов метаболитов с фунгицидиой активностью 66
1.4.2. Математическое моделирование для оптимизации условий культивирования микроорганизмов 72
2. Объекты и методы исследований 78
2.1. Объекты исследований 78
2.2. Условия хранения псевдомонад 79
2.3. Условия хранения и культивирования фитопатогенных грибов 79
2.4. Определение динамики роста бактерий в средах с различными источниками углерода
2.5. Изучение условий культивирования, влияющих на биосинтез метаболитов Pseiidomonas, обладающих фунгицидной активностью 80
2.6. Оптимизация ферментационной питательной среды и условий культивирования псевдомонад 81
2.7. Приготовление автолизатов дрожжей 85
2.8. Определение содержание белка в дрожжевом автолизате 85
2.9. Определение массовой доли азота аминогрупп аминокислот и низших пептидов в дрожжевом автолизате 85
2.10. Определение массовой доли общего азота в дрожжевом автолизате 86
2.1 1. Выделение метаболитов Pseiidomonas, обладающих фунгицидной активностью 87
2.12. Определение рЫ - стабильности и
термостабилы-юсти низкомолекулярных фракций метаболитов Pseiidomonas 88
2.13. Методы изучения состава и структуры метаболитов Pseiidomonas, обладающих фунгицидной и фитогормональной активностью 88
2.14. Определение антигрибной активности штаммов Pseiidomonas и их метаболитов, обладающих фунгицидной активностью 89
2.15. Определение спектра антагонистического действия культур Pseiidomonas 90
2.16. Определение фитогормональной активности метаболитов Pseiidomonas 91
2.17. Исследование комплексообразования метаболитов Pseiidomonas с экссудатами растений 91
2.18. Исследование комплексообразования метаболитов Pseiidomonas с ионами металло 93
2.19. Статистическая обработка результатов 94
3. Структура и свойства экзометаболитов pseiidomonas, обладающих фунгицидной и фитогормональной активностью 95
3.1. Способность штаммов Pseiidomonas к росту и их
антигрибная активность в средах с различными источниками углерода 95
3.2. Влияние условий культивирования на биосинтез
низкомолекулярных метаболитов штаммами бактерий Pseiidomonas 103
3.2.1. Влияние углеродного и азотного питания на фунгицидную активность штаммов Pseiidomonas 103
3.2.2. Влияние температуры культивирования на фунгицидную активность штаммов Pseiidomonas 106
3.3. Динамика процессов периодического роста и образования антибиотических веществ штаммами Pseiidomonas 107
3.4. Определение состава низкомолекулярных фракций метаболитов штаммов Pseiidomonas 109
3.5. Ill гамм Pseiidomonas chlororaphis ИБ 6 продуцент цитокининов 1 12
3.6. Характеристика физико-химических свойств низкомолекулярных фракций метаболитов штаммов Pseiidomonas 1 16
3.7. Выделение метаболитов штаммов Pseiidomonas, обладающих фунгицидной активностью, оценка их чистоты и гомогенности 1 18
3.8. Определение молекулярной массы метаболитов штаммов Pseiidomonas, обладающих фунгицидной активностью 122
3.9. Аминокислотный и элементный составы метаболитов штаммов Pseiidomonas, обладающих фунгицидной активностью 123
3.10. И К- и ЯМР С- спектроскопия метаболитов штаммов Pseiidomonas, обладающих фунгицидной активностью 125
3.1 1. Ферментативный гидролиз метаболитов штаммов Pseiidomonas, обладающих фунгицидной активностью 129
3.12. Антигрибная активность триглицеридпептидов Pseudomonas 13 1
3.12.1. Характеристика антигрибной активности триглицеридпептидов псевдомонад в средах с различными источниками углерода 131
4. Комплексообразование триглицеридпептидов pseudomonas с экссудатами растений и ионами металлов 135
4.1. Исследование комплексообразования триглицеридпептидов Pseudomonas спектрофотометрическими методами 136
4.1.1. Определение комплексных соединений методом Бснта-Френча 136
4.1.2.Определение комплексных соединений методом изомолярных серий 139
4.2. Исследование комплексообразования триглицеридпептидов Pseudomonas поляриметрическим методом 142
4.3. Исследование комплексообразования триглицеридпептидов Pseudomonas полярографическим методом 149
5. Культивирование бактерий рода pseudomonas, обладающих фунгицидыой активностью 1 54
5.1. Оптимизация питательных сред при культивировании бактерий рода Pseudomonas, обладающих фунгицидной активностью 154
5.1.1. Дрожжевой автолизат - компонент питательной среды 1 55
5.1.2. Получение математических моделей для трёх штаммов Pseudomonas 158
5.1.3. Определение оптимального состава питательных сред для культивирования бактерий Pseudomonas 162
5.2. Оптимизация условий культивирования трех штаммов Pseudomonas 169
5.3. Оценка антигрибной активности штаммов Pseudomonas, выращенных в оптимальных условиях 1 71
5.4. Изучение параметров культивирования штамма Pseiidomonas chlororaphis ИБ 5 1 в периодических и непрерывных условиях 175
5.5. Питательные среды для промышленного культивирования псевдомонад и экономический эффект от использования новых сред 1 82
Заключение 186
Выводы 188
Практические предложения и рекомендации 190
Список литературы
