Введение
1. Обзор литературы 11
1.1. Полидисперсность биополимеров 11
1.2. Требования к качеству лекарственных средств на основе белков крови и полисахаридов 13
1.2.1. Определение молекулярно-массового распределения в препаратах полисахаридов 14
1.2.1.1. Препараты на основе гидроксиэтилированного крахмала 14
1.2.1.2. Методы определения молекулярно-массового распределения в препаратах на основе гидроксиэтилированного крахмала 16
1.2.1.3. Препараты на основе декстрана 21
1.2.1.4. Методы определения молекулярно-массового распределения в препаратах на основе декстрана 22
1.2.2. Определение молекулярно-массового распределения в препаратах белков крови 25
1.2.2.1. Молекулярно-массовое распределение в препаратах альбумина 27
1.2.2.2. Молекулярно-массовое распределение в препаратах на основе иммуноглобулина 29
1.2.2.3. Проблемы при определении молекулярно-массового распределения в препаратах на основе белков крови 33
1.3. Многоугловое лазерное светорассеяние 35
1.3.1. Теория метода статического светорассеяния 36
1.3.2. Использование многоуглового лазерного светорассеяния для определения молекулярно-массового распределения биополимеров 38
1.4. Валидация методик 40
2. Материалы и методы исследования 42
2.1. Оборудование 42
2.2. Субстанции и фармацевтические препараты, использованные в работе 42
2.3. Стандарты и реактивы 44
2.4. Определение молекулярно-массового распределения в препаратах на основе полисахаридов 45
2.5. Проведение валидации методики эксклюзионной хроматографии с детектором многоуглового лазерного светорассеяния 46
2.6. Определение молекулярно-массового распределения в препаратах на основе белков 48
2.7. Расчет молекулярных параметров методом статического светорассеяния 49
2.8. Статистическая обработка результатов 50
3. Результаты и обсуждение 51
3.1. Сопоставление методов определения молекулярно-массового распределения гидроксиэтилированного крахмала 51
3.1.1. Заключение к разделу 3.1 55
3.2. Валидация методики эксклюзионной хроматографии с детектором многоуглового лазерного светорассеяния 55
3.2.1. Специфичность 56
3.2.1. Прецизионность. Сходимость 56
3.2.2. Внутрилабораторная воспроизводимость 57
3.2.3. Линейность 58
3.2.4. Точность (правильность) 60
3.2.5. Диапазон применения методики 61
3.2.6. Робастность 62
3.2.7. Определение рабочей концентрации 62
3.2.8. Критерий пригодности хроматографической системы 63
3.2.9. Заключение к разделу 3.2 64
3.3. Характеристика молекулярно-массового распределения субстанций и препаратов на основе гидроксиэтилированного крахмала 64
3.4. Характеристика молекулярно-массового распределения субстанций и препаратов на основе декстрана 67
3.5. Определение молекулярных параметров методом эксклюзионной хроматографии с детектором многоуглового лазерного светорассеяния в препаратах «Альбумин, раствор для инфузий» 70
3.5.1. Мономеры и димеры альбумина 72
3.5.2. Полимеры и агрегаты альбумина 74
3.6. Определение молекулярных параметров методом эксклюзионной хроматографии с детектором многоуглового лазерного светорассеяния в препаратах «Иммуноглобулин, раствор для инфузий» 79
3.6.1. Мономеры и димеры иммуноглобулинов 79
3.6.2. Полимеры и агрегаты иммуноглобулинов 81
3.6.3. Влияние срока хранения препарата «Иммуноглобулин, раствор для инфузий», производства ГБУЗ им. Климовой на его молекулярный состав 88
3.6.4. Заключение к разделу 3.6 92
4. Заключение. Перспективы использования детектора многоуглового лазерного светорассеяния для определения молекулярных параметров и молекулярно-массового распределения биологических полимеров 93
Выводы 97
Список используемых сокращений 99
Список литературы
