Введение
Глава 1. Современные представления о гидролитических ферментах 8
1.1. Основные характеристики карбогидраз 8
1.2. Физико - химические свойства инулиназы 13
Глава 2. Иммобилизация гидролитических ферментов 25
2.1. Методы иммобилизации гидролаз 25
2.2. Применение иммобилизованных ферментов в промышленности, медицине и аналитической практике 31
2.3. Иммобилизация инулиназы на различных носителях 37
Глава 3. Объекты и методы исследования 43
3.1. Объект исследования 43
3.2. Методы исследования 43
3.2.1. Культивирование дрожжей Kluyveromyces marxianus 43
3.2.2. Определение содержания белка в препарате методом Лоури 44
3.2.3. Определение содержания белка в иммобилизованных ферментных препаратах модифицированным методом Лоури 45
3.2.4. Метод определения активности инулиназы 46
3.2.5. Метод определения активности иммобилизованной инулиназы 48
3.2.6. Очистка и определение молекулярной массы инулиназы методом гель-хроматографии 49
3.2.7. Подготовка ионообменных материалов к иммобилизации 50
3.2.8. Методика сорбционной иммобилизации инулиназы 51
Глава 4. Выделение, очистка, физико-химические свойства препаратов инулиназ из Kluyveromyces marxianus и Aspergillus awamori 52
4.1. Исследование условий экстракции и очистки препарата инулиназы Aspergillus awamori 52
4.2. Изучение условий выделения и очистки инулиназы из Kluyveromyces marxianus 59
4.3. Некоторые физико-химические свойства инулиназ из Kluyveromyces marxianus и Aspergillus awamori 64
Глава 5. Адсорбционная иммобилизация инулиназы из Kluyveromy ces marxianus на различных носителях 69
5.1. Исследование условий иммобилизации инулиназы Kluyveromyces marxianus на некоторых ионообменных смолах 69
Глава 6. Изучение кинетико-термодинамических аспектов катализа свободной и иммобилизованной инулиназой Kluyveromyces marxianus 78
6.1. Исследование кинетики реакции гидролиза инулина адсорбционно связанной инулиназой Kluyveromyces marxianus 78
6.2. Кинетико-термодинамические аспекты процесса термической инактивации инулиназы Kluyveromyces marxianus 83
6.3. Исследование закономерностей процесса термической инактивации инулиназы Kluyveromyces marxianus методом дифференциально-термического анализа 90
6.4. Основные закономерности процесса термической инактивации инулиназы Kluyveromyces marxianus, иммобилизованной на ВИОН-КН 96
Заключение 101
Выводы 105
Список литературы 107
