Введение
2. Обзор литературы 12
2.1 Классификация острой почечной недостаточности (ОПН) 12
2.1.1 Постренальная ОПН 12
2.1.2 Преренальная ОПН 12
2.1.3 Ренальная ОПН 13
2.2 Экспериментальные модели ОПН 15
2.3 Патофизиология ишемической ОПН 21
2.3.1 Патология сосудистого русла 21
2.3.2 Патология канальцев нефрона 23
2.3.3 Воспаление 25
2.3.4 Нарушения цитоскелета 30
2.3.5 Изменения внутриклеточной концентрации кальция 31
2.4 Патофизиология аминогликозидной нефротоксичности 32
2.4.1 Патология канальцев нефрона 33
2.4.2 Патология гломерулярного аппарата 36
2.4.3 Патология сосудистого русла 37
2.4.4 Воспаление 39
2.5 Роль митохондрии в патогенезе ОПН 41
2.5.1 Свидетельства митохондриальной дисфункции при ОПН 41
2.5.2 Окислительный стресс 42
2.5.3 Нитрозильный стресс 46
2.5.4 Апоптоз и неспецифическая проницаемость митохондрии 48
2.6 Митохондрия как мишень новых терапевтических подходов к лечению ОПН 53
2.6.1 Гипотермия 53
2.6.2 Ишемическое прекондиционирование 54
2.6.3 Эритропоэтин и фармакологическое прекондиционирование 56
2.6.4 Митохондриально-направленные антиоксиданты 58
3. Материалы и методы 61
3.1 Используемые реактивы: 61
3.2 Моделирование ишемии/реперфузии почки 61
3.4 Изучение кровотока при помощи высокочастотной допплеровской техники 62
3.5 Моделирование аминогликоизидной токсичности 64
3.6 Изучение глубины гипотермии 64
3.7 Определение продукции активных форм кислорода 65
3.8 Определение малонового диальдегида (МДА) в ткани почки 66
3.9 Определение концентрации белка 67
3.10 Гистологические исследования 67
3.11 Иммуноблотинг 68
3.12 Иммуногистохимическое окрашивание срезов почки 70
3.13 Определение суммарного карбонилирования белков.. 70
3.14 Статистическая обработка результатов 71
4. Результаты 72
4.1 Влияние SkQR1 на ОПН 72
4.1.1 Влияние SkQR1 и гипотермии на 90-мин ишемию почки 72
4.1.2 Влияние SkQR1 на 40-мин ишемию почки 78
4.1.3 Влияние SkQR1 на гентамициновую токсичность 83
4.2 Влияние ишемического прекондиционирования на ОПН 87
4.2.1 SkQR1 активирует сигнальные пути ишемического прекондиционирования 87
4.2.2 Нефропротекторное действие ишемического прекондиционирования при 40-мин ишемии почки 91
4.2.3 Нефропротекторное действие фармакологического прекондиционирования при гентамициновой токсичности 97
4.3 Влияние разобщения дыхания и окислительного фосфорилирования на ишемию/реперфузию почки 103
4.4 Изменения почечного кровообращения при ишемии/реперфузии почки 110
5. Обсуждение 119
5.1 Антиоксидантное действие SkQR1 119
5.2 Нефропротекторный эффект гипотермии 122
5.3 Нефропротекторный эффект активации сигнальных путей ишемического прекондиционирования 123
5.4 Нефропротекторный эффект разобщения дыхания и окислительного фосфорилирования 127
5.5 Механизмы нефропротекции при аминогликозидной токсичности 130
5.6 Патология почечного кровообращения 132
6. Выводы 137
7. Список литературы
