Введение
I. Обзор литературы 12
1.1. Апоптоз 12
1.1.1. Определение 12
1.1.2. Этапы апоптоза 12
1.1.3. Биохимическая характеристика апоптоза 13
1.1.4. Стадии апоптоза . 16
1.1.5. Апоптоз и клеточный цикл 21
1.1.6. Роль апоптоза 22
1.1.7. Апоптоз и заболевания , 23
1.2, Fas и Fas-L 24
1.2.1. Функция Fas рецептора 24
1.2.2. Структура Fas рецептора 24
1.2.3. Растворимая форма Fas рецептора... 25
1.2.4. Экспрессия Fas рецептора 25
1.2.5. Структура Fas литанда(РазЬ) 27
1.2.6. Экспрессия Fas лиганда 28
1.2.7. Fas-опосредованный апоптоз..., 29
1.2.8. Формы Fas-L ЗІ
1.2.9. Функция Fas-L 32
1.2.10. Fas может запускать пролиферацию 32
1.2.11. Патология системы Fas/Fas-L 33
1.3. Системная красная волчанка (скв) 35
1.3.1. Определение 35
1.3.2. Эпидемиология 35
1.3.3. Клинические проявления 36
1.3.4. Аутоантигены и аутоантитела при СКВ 39
1.3.5. Этиология. Причины появления аутоантител 40
1.3.6. Патогенез СКВ и антитела 42
1.3.7. Роль комплемента в патогенезе системной красной волчанки 43
1.3.8. АпоптозиСКВ 44
1.3.9. Факторы влияющие на апоптоз при СКВ 45
1.3.10. Лимфоциты и СКВ 49
1.3.11 НейтрофилыиСКВ 50
2. Материалы и методы 51
2.1.Использованные материалы и реактивы 51
2.2. Группы обследованных больных 52
2.3. Методика выделения мононуклеарных лейкоцитов, их фракций и гранулоиитов периферической крови человека 55
2.4.Исследование структуры ДНК прямым флуориметрическим методом 57
2.5.Методы определения количества апоптотических клеток 58
2.6. Методы определения Fas/FasL и растворимого s Fas 60
2.7.Метод определения ВсЬ2 61
2.8. Определение общей гемолитической активности комплемента 62
2.9.Статистическая обработка данных 63
3. Результаты исследований и их обсуждение 64
3.1. Повреждение структуры ДНК лейкоцитов периферической крови у больных
системной красной волчанкой и другими аутоиммунными заболеваниями как маркер
апоптогенной готовности 64
3.1.1. Исследование уровня повреждений ДНК иммунокомпетентных клеток при СКВ 65
3.1.2. Изучение апоптоза лимфоцитов и гранулоцитов при СКВ , 67
3.1.3. Исследование корреляции между титром аутоантител, уровнем повреждений ДНК и апоптозом клеток крови 74
3.1.4. Исследование уровня апоптоза лимфоцитов в зависимости от суточной дозы преднизолона у больных СКВ 77
3.1.5. Исследование динамического изменения повреждений ДНК в зависимости от терапии у больных СКВ 80
3.1.6. Анализ субпопуляций лимфоцитов у больных СКВ 82
3.2. Исследование роли системы Fas/Fas-L в регуляции апоптоза при СКВ 86
3.2.1. Оценка уровня экспрессии Fas/Fas-L в лейкоцитах периферической крови при СКВ 87
3.2.2. Исследование экспрессии CD95 (Fas) и оценка уровня апоптоза различных субпопуляций лимфоцитов 90
3.2.3. Определение растворимого sFas в плазме больных СКВ 94
3.2.4.Определение зависимости относительного содержания sFas/Fas от содержания активированных лимфоцитов 98
3.2.5. Изучение взаимосвязи уровня sFas и титра антиядерных антител 98
3.2.6. Изучение системы комплемента у больных СКВ 100
3.2.7. Изучение антифосфолипидного иммунного ответа 101
3.2.8.Определение экспрессии bcl-2 у больных СКВ 102
Заключение 104
Выводы 112
Список литературы 114
