Введение
Глава 1. Обзор литературы 10
1.1. Иммунотропные лекарственные препараты: классификация и клиническое применение 10
1.1.1. Иммунопатология как элемент патогенеза заболеваний 10
1.1.2. Иммуносупрессанты и иммуностимуляторы 11
1.2. Лекарственные препараты на основе биологически активных пептидов 14
1.3. Современные представления об организации и функциональной активности экстраклеточного матрикса 21
1.3.1. Коллагеновые белки - один из важнейших компонентов ЭКМ 23
1.3.2. Регуляторный потенциал экстраклеточного матрикса и механизмы его реализации 25
1.3.3. Рецепторы для компонентов ЭКМ 28
1.4. Матрикины - новый класс регуляторных пептидов 32
1.4.1. Коллаген как источник регуляторных пептидов 37
Глава 2. Материалы и методы исследования 44
2.1. Схема постановки экспериментов 44
2.2. Объекты исследования 44
2.2.1. Кровь здоровых доноров 44
2.2.2. Фибробласты линии М-19 и условия их культивирования 45
2.2.3. Экспериментальные животные 46
2.3. Тестируемая фракция коллагеновых пептидов 46
2.3.1. Выделение стандартного препарата коллагена I типа 46
2.3.2. Определение концентрации коллагена в растворе по содержанию оксипролина 47
2.3.3. Очистка бактериальной коллагеназы 48
2.3.4. Получение фракции низкомолекулярных КП 49
2.4. Методы исследования 49
2.4.1. Выделение клеток из периферической крови человека и подготовка их к культивированию 49
2.4.2. Оценка функциональных характеристик клеток периферической крови человека 51
2.4.3. Исследование хемотаксиса нейтрофилов и макрофагов на модели in vivo 59
2.4.4. Модель экспериментального перитонита 60
2.4.5. Исследование плазменного гемостаза 62
2.4.6. Определение пролиферативной активности фибробластов линии М-19 63
2.4.7. Статистическая обработка результатов 63
Глава 3. Результаты собственных исследований 65
3.1. Действие КП на МНК периферической крови человека 65
3.1.1. Действие КП на спонтанную и индуцированную различными агентами пролиферацию МНК 65
3.1.2. Влияние КП на апоптоз МНК 69
3.2. Регуляция функциональной активности фагоцитов периферической крови человека под действием КП 75
3.2.1. Исследование влияния КП на фагоцитарную реакцию нейтрофилов и моноцитов человека 75
3.2.2. Влияние КП на продукцию активных форм кислорода нейтрофилами и моноцитами периферической крови 79
3.2.3. Влияние КП на развитие апоптоза нейтрофилов 81
3.2.4. Исследование миграционной активности лейкоцитов под действием КП в модели in vivo 83
3.2.5. Изучение влияния КП на развитие экспериментального перитонита 86
3.3. Дополнительные фармакологические эффекты КП 89
3.3.1. Действие КП на систему гемостаза 89
3.3.2. Действие КП на пролиферативную активность фиброб-ластов линии М-19 92
Глава 4. Обсуждение результатов 94
Выводы 104
Список литературы 105
