Введение
ГЛАВА 1. Роль метаболитов ненасыщенных жирных кислот во внутриклеточной сигнализации 8
1.1. Основные представления о внутриклеточной сигнализации
1.1.1. Внутриклеточные посредники передачи сигнала 9
1.1.2. МАР-киназы в передаче внутриклеточного сигнала 11
1.2. ФЛАг и основные пути окисления арахидоно вой и линолевой кислот 12
1.2.1 ФЛАг и регуляция ее активности 12
1.2.2.0сновные пути ферментативного окисления арахидоновой и линолевой кислот 13
1.2,3. Участие арахидоновой кислоты и продуктов окислительного метаболизма ненасыщенных жирных кислот воо внутриклеточной сигналиизации 16
1.3. Роль ненасыщенных жирных кислот в регуляции основных клеточных функций... 18
1.3.1.Участие продуктов окисления ненасыщенных жирных кислот в воспалительных реакциях 18
1.3.2. Роль ненасыщенных жирных кислот и продуктов их окисления в пролиферации и гибели клеток 20
Резюме 22
ГЛАВА 2, Метабол ненасыщенных жирных кислот в опухолевых клетках 25
2.1. Роль продуктов окисления ненасыщенных жирных кислот в регуляции пролиферации и дифференцировки опухолевых клеток 26
2.2. Роль продуктов окисления ненасыщенных жирных кислот в гибели опухолевых клеток 29
Резюме 32
ГЛАВА 3. Радиационный апоптоз тимоцитов 33
3.1. Апоптоз тимоцитов в норме 33
3.2. Апоптоз тимоцитов после облучения (феноменология) 34
3.3. О некоторых аспектах генной регуляции радиационного апоптоза 35
3.4. О внутриклеточной сигнализации при радиационном апоптозе тимоцитов 37
3.5. Роль мембран в радиационном апоптозе тимоцитов 40
Резюме 43
Экспериментальная часть. Материалы и методы исследования
1. Объект исследования 44
2. Ингибиторный анализ 44
3. Методы определения апоптоза 45
4. Выделение белка из тимоцитов 46
5. Выделение 15-липоксигеназыизретикулоцитов 46
6. Определение активности 15-липоксигеназы 47
Результаты исследований и их обсуждение.
Часть 1. Исследование метаболизма ненасыщенных жирных кислот в гибели опухолевых клеток лимфолейкоза Р388 48
1.1. Исследование действия общих ингибиторов метаболизма ненасыщенных жирных кислот на клетки лимфолейкоза Р388 48
1.2. Исследование действия специфических ингибиторов липоксигеназ на клетки лимфолейкоза Р388 52
1.3. Исследование действия продукта циклооксигеназы - простагландина Ег на клетки лимфолейкоза Р388 57
Резюме 61
Часть 2. Исследование роли метаболитов ненасыщенных жирных кислот в гибели нормальных лимфоидных клеток 62
2.1. Исследование действия неспецифических ингибиторов метаболизма ненасыщенных жирных кислот на тимоциты 62
2.2. Исследование роли метаболитов ненасыщенных жирных кислот в радиационной гибели тимоцитов 64
2.3. Исследование действия продукта 15-липоксигеназы на интактные тимоцйты крыс in vitro 70
Резюме 72
Часть 3. Исследование активности 15-ЛО при радиационном апоптозе тимоцитов 74
3.1. Отработка оптимальных условий измерения активности 15-липоксигеназы 74
3.2. Исследование активности 15-липоксигеназы спленоцитов крысы 76
3.3. Исследование активности 15-липоксигеназы в интактных и облученных тимоцитах 77
Резюме 80
Заключение 81
Выводы 84
Список литературы 85
