Введение
ГЛАВА I. Обзор литературы 8
1.1 . Синтез осмолитов как способ повышения устойчивости к абиотическим стрессовым воздействиям . 8
1.2. Устойчивость растений к абиотическим стрессам 9
1.2.1. Солеустойчивость растений. 10
1.2.2. Засухоустойчивость растений. 12
1.2.3. Устойчивость к изменениям кислотности почвы 13
1.2.4. Устойчивость растений к токсическим концентрациям тяжелых металлов . 13
1.3. Роль пролина при стрессе. 24
1.4. Методы получения трансгенных растений. 30
1.5. Явление сайленсинга у трансгенных растений 32
ГЛАВА 2. Материалы и методы исследования 36
2.1. Материалы 36
2.2. Методы получения трансгенных растений табака. 36
2.3. Анализ наследования маркерного гена nptll в поколениях растений табака . 37
2.4. Анализ содержания свободного пролина в тканях растений. 38
2.5. Анализ солеустойчивости ГМ растений. 38
2.6. Оценка уровня оводненности растений. 38
2.7. Анализ устойчивости ГМ растений к токсичным аналогам пролина. 39
2.8. Оценка устойчивости ГМ растений к повышенному уровню солей 39 тяжелых металлов.
2.9. Определение концентрации хлорофиллов а и b в листьях растений. 39
2.10. Оценка степени повреждения мембран в клетках растений в условиях осмотического стресса. 40
2.11. Оценка роста растений на твердых средах с повышенным содержанием агара. 41
2.12. Оценка всхожести семян и развития проростков растений табака в условиях осмотического стресса. 41
2.13. Влияние высоких температур на всхожесть семян табака. 41
2.14. Определение активности фермента пролиндегидрогеназы в тканях 41 растений.
2.15. Статистические методы исследования. 43
ГЛАВА 3. Результаты и обсуждение 45
3.1. Получение генетически модифицированных растений табака . 45
3.2. Анализ числа встроенных инсерций по фенотипам проростков в 46 поколении Ті.
3.3. Солеустойчивость генетически модифицированных растений. 51
3.3.1. Влияние засоления на прорастание семян и развитие проростков. 51
3.3.2. Влияние засоления на развитие растений табака. 52
3.4. Устойчивость ГМ растений к токсичным аналогам пролина. 56
3.5. Устойчивость ГМ растений к осмотическому стрессу. 62
3.6. Устойчивость ГМ растений к воздействию высоких температур. 64
3.7. Устойчивость ГМ растений к повышенному уровню солей тяжелых металлов. 65
Заключение 72
Выводы 78
Цитируемая литература
