Введение
Глава 1. Современные представления о структурной организации биологических мембран и липопротеидов. Исследование их пространственной организации с помощью флуоресцентных зондов 9
1.1. Методы исследования структуры мембран и липопротеидов 9
1.2. Липидная фаза мембран 13
1.2.1. Модельные липидные мембраны 14
1.2.2. Биологические мембраны 16
1.3. Упаковка липидов в липопротеидах плазмы крови 25
1.4. Использование синглет-синглетного переноса энергии между флуоресцентными зондами для изучения конструкции белок-липидных ансамблей 29
1.4.1. Теория переноса энергии Фёрстера-Галанина 29
1.4.2. Применение переноса энергии в изучении мембран и липопротеидов 30
1.4.3. Геометрические параметры белок-липидных ансамблей: определение с помощью безызлу-чательного переноса энергии 32
1.4.4. Флуоресцентные зонды - доноры и акцепторы безызлучательного переноса энергии 40
Глава 2. Материалы и методы исследований 43
2.1. Модельные фосфолипидные мембраны (липосомы) 43
2.2. Модельные сферические частицы (липидные шары) 44
2.3. Биологические мембраны 45
2.3.1. "Тени" эритроцитов 45
2.3.2. Оаркоплазматический ретикулум 46
2.3.3. Микросомы печени крыс 46
2.4. Липопротеиды плазмы крови 47
2.5. Измерение концентрации мембран и липопротеидов 48
2.6. Флуоресцентные зонды 48
2.7. Регистрация спектров поглощения и флуоресценции 49
2.8. Измерение эффективности безызлучательного переноса энергии 52
Глава 3. Новые флуоресцентные зонды: оптические свойства и взаимодействие с липосомами 53
3.1. Флуоресцентные зонды - производные пиридина - для исследования структуры мембран и липопротеидов 53
3.1.1. Структурные формулы, растворимость, спектральные характеристики 54
3.1.2. Взаимодействие с липосомами 56
3.1.3. Безызлучательный перенос энергии между зондами 59
3.2. Холеста-5,7,9(И)-триен-3^-ол: оптические свойства и поведение в липидном бислое 74
3.3. Антрацен 81
3.4. п-Терфенил 82
3.5. Обсуждение и выводы 89
Глава 4. Измерение геометрических параметров липидного слоя модельных и биологических мембран с помощью флуоресцентных зондов 92
4.1. Модельные мембраны (липосомы) 92
4.1.1. Измерение площади поверхности и толщины липидного бислоя 93
4.1.2. Влияние холестерина на геометрические параметры липидного бислоя 97
4.1.2.1. "Конденсирующий" и "деконденсирующий" эффекты холестерина 97
4.1.2.2. Влияние состава фосфолипидов на "конденсирующий эффект холестерина 105
4.1.2.3. Влияние В-холестатриена на площадь поверхности липидного бислоя 107
4.2. Геометрические параметры белково-липидных мембран 112
4.2.1. Определение площади поверхности и толщины мембраны эритроцитов 113
4.2.2. Определение площади поверхности и толщины мембраны саркоплазматического ретикулума 118
4.2.3. Ассоциация белков в биологических мембранах 121
4.3. Обсуждение и выводы 125
Глава 5. Упаковка липидов в липопротеидах плазмы крови и в липидных частицах, моделирующих липопротеиды 129
5.1. Принципы формирования и размеры липидных частиц 129
5.2. Геометрические параметры липопротеидов плазмы крови: радиус, объем и площадь поверхности 133
5.3. Локализация и упаковка холестерина в липидных шарах и липопротеидах плазмы крови 139
5.4. обнаружение "твердых" ядер в липидных шарах и липопротеидах низкой и очень низкой плотности 144
5.5. Обсуждение и выводы 148
Заключение 152
Выводы 156
Список литературы 158
