Введение
Глава 1 Литературный обзор 12
1.1 Строение волоса 12
1.2 Строение шерсти животных 13
1.3 Фазы роста волоса 14
1.4 Химический состав волос 15
1.5 Химический состав шерсти животного 16
1.6 Пути поступления веществ в структуру волоса 17
1.7 Сроки обнаружения токсических веществ в волосах 18
1.8 Рекомендации по отбору проб волос для исследования 19
1.9 Методы пробоподготовки 21
1.10 Этапы пробоподготовки волос 22
1.10.1 Очистка волос 22
1.10.2 Методы изолирования токсикантов из образцов волос 24
1.10.2.1 Экстракция органическим растворителем 24
1.10.2.2 Методики кислотного и щелочного гидролиза 25
1.10.2.3 Методики ферментативного гидролиза 25
1.10.2.4 Сверхкритическая экстракция 31
1.10.3 Методы очистки и концентрирования извлечений 31
1.10.4 Методы идентификации и количественного определения веществ.. 32
1.10.5 Интерпретация полученных результатов 34
1.11 Валидация аналитических методик 35
1.11.1 Разработка аналитических методик 35
1.11.2 Валидация разработанных методик анализа 36
1.12 Характеристика модельных лекарственных веществ 40
1.12.1 Производные барбитуровой кислоты 40
1.12.2 Производное бензгидрола (дифенгидрамина гидрохлорид) 43
1.12.3 Лекарственный препарат, содержащий тропикамида гидрохлорид.. 45
Выводы по главе 1 48
Экспериментальная часть
Глава 2 Объекты и методы исследования 49
2.1 Объекты исследования 49
2.1.1 Приготовление комплексного растворителя для исследования.. 54
2.2 Методы исследования 55
2.3 Исследование модельных лекарственных веществ методом газовой хроматографии с масс-селективным детектированием (ГХ–МС) 55
Выводы по главе 2 72
Глава 3 Моделирование длительного употребления лекарственных веществ на лабораторных животных 73
3.1 Приготовление рабочих растворов для моделирования длительного употребления лекарственных веществ на лабораторных животных 73
3.1.1 Расчет концентрации растворов модельных лекарственных веществ 73
3.1.2 Приготовление растворов модельных лекарственных веществ 74
3.2 Моделирование длительного употребления лекарственных веществ на лабораторных животных 75
3.3 Отбор шерсти лабораторных животных 76
Выводы по главе 3 78
Глава 4 Изолирование модельных лекарственных веществ из образцов шерсти лабораторных животных с применением кислотного и щелочного гидролиза 79
4.1 Подготовка образцов шерсти для проведения гидролиза 79
4.2 Кислотный гидролиз образцов шерсти лабораторных животных 80
4.2.1 Гидролиз образцов шерсти хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М 80
4.2.2 Гидролиз образцов шерсти хлористоводородной кислоты раствором 6 М 82
4.3 Щелочной гидролиз образцов шерсти лабораторных животных 88
Выводы по главе 4 93
Глава 5 Изолирование модельных лекарственных веществ из образцов шерсти животных с применением гидролиза протеолитическими ферментами 94
5.1 Определение оптимальных условий гидролиза на примере химотрипсина образцов белой и черной шерсти, содержащих фенобарбитал и дифенгидрамин 94
5.2 Гидролиз трипсином образцов белой и черной шерсти животных, содержащих фенобарбитал и дифенгидрамин 107
5.3 Гидролиз химопсином образцов белой и черной шерсти животных, содержащих фенобарбитал и дифенгидрамин. 113
5.4 Гидролиз папаином образцов белой и черной шерсти животных, содержащих фенобарбитал и дифенгидрамин 119
5.5 Оценка сходимости и внутрилабораторной воспроизводимости методик гидролиза химотрипсином, трипсином, химопсином и папаином 125
5.6 Степень накопления модельных лекарственных веществ в природно окрашенных и природно неокрашенных образцах шерсти животных 130
Выводы по главе 5 132
Глава 6 Апробация разработанных методик ферментативного гидролиза 134
6.1 Апробация разработанных методик ферментативного гидролиза на образцах шерсти лабораторных животных, содержащей тропикамид. 134
6.1.1 Моделирование длительного употребления тропикамида гидрохлорида 134
6.1.2 Гидролиз образцов шерсти животных калия гидроксида раствором 2М 135
6.1.3 Проведение гидролиза химотрипсином, химопсином и папаином образцов шерсти животных, содержащих тропикамид 137
6.2 Апробация разработанных методик гидролиза протеолитическими ферментами на экспертном материале (волосы) освидетельствуемых лиц. 140
6.2.1 Отбор и подготовка образцов волос для проведения гидролиза. 140
6.2.3 Кислотный/щелочной и ферментативный гидролиз образцов волос .. 140
Выводы по главе 6 148
Заключение 149
Список литературы 151
Приложение A 165
Приложение Б 175
