Введение
I. Обзор литературы
1.1. Экспериментальные подходы, используемые для получения и изучения свойств изолированных субъединиц олигомерных ферментов..8
1.2. Структура ГАФД и прявления взаимодействия субъединиц в олигомерной молекуле фермента 24
1.3. Факторы, влияющие на функционирование ГАФД в физиологических условиях ...44
Экспериментальная часть
2.1. Материалы . 50
2.2. Получение 1,3-дифосфоглицерата 51
2.3. Выделение ГАФД из пекарских дрожжей 52
2.4. Выделение фосфоглицераткиназы из пекарских дрожжей 53
2.5. Иммобилизация ферментов 55
2.6 Определение концентрации белка
2.6.1. Определение концентрации растворимого белка 57
2.6.2. Определение концентрации -иммобилизованного белка 58
2.,7. Определение активностей ферментов ...59
Результаты и их обсуждение
3.1. Получение нативных мономеров ГАФД 61
3.2. Получение иммобилизованных мономеров ЛДТ .. 73
3.3. Получение иммобилизованных тримеров ГАФД 80
3.4. Проявление межсубъедини чной кооперативности ГАФД в катализе . 91
3.5. Комплекс ГАФД с фосфоглицераткиназой 109
3.6. Влияние образования комплекса ГАФД с фосфоглицераткиназой на кооперативность активных центров ГАФД .115
Заключение 120
Выводы 122
