Введение
2. Обзор литературы 9
2.1. Вирус гриппа 9
2.2.Классификация нейраминидаз 13
2.3. Структура нейраминидаз 14
2.3.1. Цитоплазматический участок 16
2.3.2. Трансмембранный домен 18
2.1..3. Стебель 18
2.3.4. Голова 21
2.3.5. Гликозилирование 26
2.4.Строение каталитического центра 28
2.5.Механизм реакции 31
2.6.Ингибиторы нейраминидаз 33
2.6.1. Мутации в NA, отвечающие за устойчивость вирусов к ингибиторам NA 36
2.6.2. Мутации в НА, возникающие под действием ингибиторов NA 38
2.6.3. Современная ситуация с возникновением резистентных штаммов вируса гриппа 40
2.7.Определение активности и специфичности нейраминидазы вируса гриппа 43
2.7.1. Определение активности 43
2.7.2. Изучение субстратной специфичности 46
2.7.3. Известные литературные данные об олигосахаридной специфичности NA вирусов гриппа 48
2.8.Корреляция активностей гемагглютинина и нейраминидазы 53
2.8.1. Восстановление функционального баланса в реассортантных вариантах 53
2.9. Восстановление функционального баланса при дефектах вируса гриппа 55
3. Материалы и методы 57
4. Результаты и обсуждение 70
4.1.Метод определения активности и специфичности нейраминидаз с помощью BODIPY-меченых олигосахаридов 70
4.2. Определение активности NA вируса гриппа 81
4.3.Влияние вирусных белков на действие нейраминидазы 85
4.3.1. Удаление NA с вирусной частицы. Сравнение свободной и вирус-связанной нейраминидазы 85
4.3.2. Изменние типа гемагглютинина и М-белка 90
4.4.Влияние хранения вакцинных штаммов вируса гриппа на профиль специфичности NA 94
4.5. Восстановление функционального баланса HA-NA в реассортантных вирусах 97
4.6. Субстратная специфичность вирусных реассортантов подтипа H5N2 109
4.7. Субстратная специфичность NA вирусов подтипа H9N2 111
4.8.Роль а.к. остатков 258, 275, 331, 339, 367, 370, 400 и 431 в функционировании нейраминидазы N2 115
4.9.Специфичность исследованных вирусов гриппа: общие закономерности 117
4.10. Вирусы, устойчивые к тамифлю 120
Заключение 123
Выводы 125
Благодарности 127
Список литературы 128
