Введение
1. Современные взгляды на церебропротекцию с позиций молекулярных и клеточных механизмов ишемического, реперфузионного и травматического поражения головного мозга (литературный обзор) 16
1.1 Механизмы ишемического повреждения клеток и их гибели 18
1.2 Эксайтотоксичность и ИИ 22
1.2.1 Гиперактивация глутаматных рецепторов в реализации эксайтотоксичности 22
1.2.2 Роль кальция в формировании ишемического повреждения головного мозга 26
1.2.3 Окислительный стресс – ведущий механизм повреждения нейронов 27
1.2.4 Роль кальпаинов в эксайтотоксичности при ИИ 31
1.2.5 Дисфункция митохондрий как потенциальный таргет для фармакологического воздействия при ишемии ГМ 32
1.3 Участие апоптотических механизмов в повреждении ГМ при ишемии 33
1.4 Естественные антиоксиданты в профилактике и коррекции церебральной ишемии 34
1.5 Перспективные фармакологические стратегии при ишемии, реперфузии и травматическом повреждении ГМ 37
2. Материал и методы исследования 40
2.1 Краткая характеристика исследуемых в диссертации вещества и препаратов сравнения 40
2.2 Биологические объекты, используемые при выполнении работы 42
2.2.1 Лабораторные животные 42
2.2.2 Культура клеток гиппокампа 43
2.3 Методы исследования in vivo 45
2.3.1 Исследование острой токсичности при внутривенном введении 45
2.3.2 Метод воспроизведения фокальной ишемии головного мозга с последующей реперфузией 45
2.3.3 Метод изучения нейропротекторного действия ЛХТ-3-18 на модели необратимой перевязки средней мозговой артерии у крыс 47
2.3.4 Методы определения концентрации глутаминовой кислоты и антирадикальной активности в крови и ткани головного мозга крысы 49
2.4 Методы исследования in vitro 49
2.4.1 Измерения флуоресценции 49
2.4.2 Иммуноцитохимический метод 50
2.4.3 Метод формирования глюкозо-кислородной депривации. 51
2.4.4 Анализ выживаемости клеток 51
2.5 Метод статистической обработки полученных результатов 52
3. Исследование церебропротекторного действия цинковой соли таурина на модели фокальной ишемии СМА 53
3.1 Нейропротекторное действие цинковой соли таурина на модели ишемии-реперфузии головного мозга крыс 54
3.2 Нейропротекторное действие цинковой соли 2-амино-этансуль-фоновой кислоты на модели необратимой перевязки средней мозговой артерии крыс 62
3.3 Результаты оценки влияния ЛХТ-3-18 на кислород-зависимую функциональную активность нейтрофилов 65
4. Влияние цинковой соли 2-аминоэтансульфоно вой кислоты ЛХТ-318 на функциональную активность и выживаемость различных популяций нейронов в условиях глюкозо-кислородного дефицита 67
4.1 Эффект глюкозно-кислородного дефицита (OGD) на гибель и Са2+-сигналы нейронов гиппокампа в зависимости от их эргичности и содержания Са2+-связывающего белка парвальбумина 67
4.2 Нейропротекторный эффект ЛХТ-3-18 в отношении различных типов нейронов гиппокампа в условиях OGD 71
4.3 Нейропротекторный эффект ЛХТ-3-18 в отношении кальбиндин-содержащих ГАМКергических нейронов гиппокампа в условиях глюкозо-кислородной депривации 81
5. Заключение 91
5.1 Перспективы дальнейшего развития темы диссертационного исследования 102
Выводы 103
Практические рекомендации 105
Список обозначений и сокращений 106
Библиографический список 107
