Введение
Глава 1. Обзор литературы 22
1.1.1. Общее представление о чуме, псевдотуберкулёзе и их возбудителях 22
1.1.2. Характеристика основных фенотипических признаков для идентификации возбудителя эпидемической чумы (Y. pestis subsp. pestis) и дифференциации от Y. рseudotuberculosis 27
1.1.3. Дополнительные тесты дифференциации иерсиний по фенотипическим признакам 29
1.1.4. Методы дифференциации иерсиний чумы и псевдотуберкулёза. Полимеразная цепная реакция 31
1.2. Факторы, осложняющие детекцию и идентификицию Y. pestis и Y. рseudotuberculosis 39
1.2.1. Смешанные культуры бактерий Y. pestis и Y. рseudotuberculosis 39
1.2.2. Основные формы изменчивости Y. pestis. Атипичные штаммы 41
1.2.3. «Плазмидные» рекомбинанты Y. pseudotuberculosis 49
Собственные исследования 52
Глава 2. Объекты, материалы и методы исследований 52
2.1. Бактериальные штаммы 52
2.2. Среды культивирования 52
2.3. Методы изучения фенотипических свойств 53
2.4. Выявление плазмид 53
2.5. Иммунологические тесты 54
2.6. Определение биологической активности штаммов на модели животных и макрофагах 55
2.7. Варианты ПЦР с бактериальными культурами и материалом от животных 57
2.8. Методы выделения и изучения структуры антигенного комплекса FV 60
Глава 3. Сравнение эффективности регламентированных тестов для дифференциации штаммов y. pestis и y. pseudotuberculosis 67
3.1. Вариабельность диагностических признаков, затрудняющая идентификацию штаммов иерсиний, и выбор наиболее надёжныхтестов, определяющих видовую принадлежность 67
3.2. Подходы к идентификации атипичных диссоциирующих штаммов чумного микроба и дифференциации их от бактерийпсевдотуберкулёза 78
Глава 4. Подходы к детекции и идентификации смешанных культур возбудителей чумы и псевдотуберкулёза 90
4.1. Приём обнаружения смешанных культур возбудителей чумы и псевдотуберкулёза 90
4.2. Подход к разделению и идентификации смешанных культур Y. pestis и Y. pseudotuberculosis 93
Глава 5. Особенности свойств и детекции штаммов y. pestis, не продуцирующих капсульный антиген «фракция 1» (F1) 96
5.1. Некоторые свойства «бесфракционных» штаммов Y. pestis и подходы к их идентификаци 96
5.2. Эксперименты на биопробных животных, различающихся по чувствительности к Fra– штаммам Y. pestis, и идентификация выделенных от них культур 99
5.3. Возможные подходы для выяснения причин нарушения продукции антигена F1 104
Глава 6. Исследования рекомбинантов y. pseudotuberculosis с плазмидами возбудителя чумы 111
6.1. Некоторые свойства рекомбинантных вариантов возбудителя псевдотуберкулёза с pFra и pCad плазмидами бактерий чумы и подходы к их детекции 111
Глава 7. Характеристика антигенного комплекса fv y. pestis 122
7.1. Первичная характеристика препаратов антигена FV 122
7.2. Выявление иммунологически активных компонентов антигена FV 127
7.3. Анализ tal-гена 130
Заключение 137
Выводы 153
Список литературы
