Введение
1. Обзор литературы
1.1. Механизмы гибели нейронов при ишемическом инсульте 10
1.1.1. Современные представления о биохимических изменениях при локальной ишемии 10
1.1.2. Механизм апоптотической гибели нейронов при ишемии 13
1.1.3. Взаимосвязь стресса, развития депрессий и нейродегенеративных заболеваний 16
1.2. Мозговой нейротрофический фактор - BDNF 18
1.2.1. Характеристика нейротрофинов 19
1.2.2. BDNF - член семейства нейротрофинов 20
1.2.3. Строение и регуляция гена BDNF 22
1.2.4. Рецепторы нейротрофинов 24
1.2.5. Экспрессия BDNF в нервной системе 28
1.2.6. Взаимовлияние различных факторов и экспрессии BDNF 30
1.2.6.1. Связь с нейромедиаторами 30
1.2.6.2. Связь с гормонами 34
1.2.7. Влияние стресса на экспрессию BDNF в различных структурах мозга 35
1.2.8. Фармакологические подходы к регуляции уровня BDNF 38
1.3. Афобазол - новый селективный анксиолитик 40
2. Материалы и методы исследований 45
2.1. Определение уровня BDNF методом иммуноферментного анализа 46
2.2. Тест «Открытое поле» 48
2.3. Моделирование окислительного стресса и глутаматнои токсичности in vitro 50
2.3.1. Модель глутаматной токсичности 50
2.3.2. Модель окислительного стресса 51
2.4. Методы оценки жизнеспособности нейронов в культуре
2.4.1. МТТ-тест 52
2.4.2. Окраска флюоресцентным ядерным красителем Хёхст 53
2.5. Иммунофлюоресцентный метод определения активной каспазы-3 53
2.6. Статистическая обработка результатов 54
3. Нейропротекторные свойства афобазола в экспериментах IN VITRO
3.1. Исследование нейропротекторного действия афобазола на модели окислительного стресса 55
3.2. Исследование нейропротекторного действия афобазола на модели глутаматной токсичности 60
3.3. Исследования влияния афобазола на активную каспазу-3 67
3.4. Изучение влияния афобазола на уровень BDNF в культуре клеток НТ-22 70
4. Оценка влияния афобазола на уровень bdnf в различных структурах мозга в экспериментах IN VIVO
4.1. Исследование содержания BDNF в структурах головного мозга мышей C57BL/6 и BALB/c в различное время года 72
4.2. Изменения уровня BDNF в структурах головного мозга мышей C57BL/6 и BALB/c при стрессовых воздействиях 77
4.3. Влияние афобазола на содержание BDNF в структурах головного мозга мышей C57BL/6 и BALB/c в условиях эмоционального стресса 83
Заключение 104
Выводы 116
