Введение
ГЛАВА 1. Обзор литературы.
Влияние межклеточных сигнальных молекул на процесс программируемой гибели клеток путем апоптоза в головном мозге 9
1.1. Роль апоптоза в поддержании тканевого гомеостаза и его молекулярные механизмы 9
1.1.1. Молекулярные механизмы апоптоза 10
1.1.1.1. Семейство цистеиновых протеаз - каспаз 11
1.1.1.2. Семейство BCL-2-подобных белков 13
1.1.1.3. Запуск программы апоптоза 17
1.2. Значение апоптоза в развитии центральной нервной системы 19
1.2.1. Эффекты модуляции экспрессии ключевых белков апоптоза на программируемую гибель клеток ЦНС методами генетической
рекомбинации 20
1.3. Влияние межклеточных сигнальных молекул на процесс апоптоза в головном
мозге 22
1.3.1. Глюкокортикоидные гормоны, ЦНС и апоптоз 23
1.3.1.1. Эффекты глюкокортикоидов в раннем онтогенезе 25
1.3.1.2. Глюкокортикоиды и апоптоз 28
1.3.2. Межнейронная сигнализация и апоптоз 31
1.3.2.1. Норадреналин, ЦНС и апоптоз 34
1.3.2.2. Эффекты адренергических препаратов на апоптоз 37
ГЛАВА 2. Материалы и методы 44
2.1. Животные и экспериментальные воздействия 44
2.1.1. Животные 44
2.1.2. Введение гидрокортизона 44
2.1.3. Инъекция клонидина 45
2.2. Выделение образцов ткани мозга 46
2.3. Определение содержания ДНК в ткани 46
2.4. Выделение РНК 46
2.5. Определение количества мРНК каспазы-3, Вах и Bcl-XL методом полуколичественной ревертивной полимеразной цепной реакции 47
2.6. Выделение ДНК 48
2.7. Анализ фрагментации ДНК 49
2.8. Определение плотности альфа2А-адренорецепторов в мозге 50
2.9. Реактивы 51
2.10. Статистическая обработка данных 51
ГЛАВА 3. Результаты 53
3.1. Разработка метода количественной оценки фрагментации ДНК 53
3.2. Экспрессия мРНК Вах, Bcl-XL и каспазы-3 в коре и стволе головного мозга крыс в онтогенезе 55
3.3. Изменение числа клеток и уровня мРНК каспазы-3 в коре и стволе головного мозга крыс в онтогенезе 57
3.4. Влияние гидрокортизона на вес тела, мозга и надпочечников крыс в перинатальный период развития 58
3.5. Эффекты гидрокортизона на уровень мРНК Вах, Bcl-XL, каспазы-3 и на фрагментацию ДНК в развивающемся головном мозге крыс 59
3.5.1. Внутриутробный период 59
3.5.2. Неонатальный период 60
3.5.2.1. Однократное введение гидрокортизона 60
3.5.2.2. Двукратное введение гидрокортизона 61
3.5.3. Эффекты гидрокортизона на фрагментацию ДНК в головном мозге в перинатальный период развития крыс 61
3.6. Эффекты клонидина на уровень мРНК каспазы-3 и фрагментацию ДНК в развивающемся головном мозге крыс 62
3.6.1. Число мест специфического связывания альфа2-адренергических лигандов 62
3.6.2. Уровень мРНК каспазы-3 63
3.6.3. Фрагментация ДНК 64
ГЛАВА 4. Обсуждение результатов 65
Выводы 81
Список литературы 83
