Введение
ГЛАВА I. Обзор литературы 13
1.1. Характеристика геномной нестабильности и цитогенетиче-ских нарушений, индуцированных бактериями 13
1.2. Регуляция клеточного цикла и стабильность генома 17
1.3. Образование реактивных метаболитов кислорода и азота и их роль в индукции цитогенетических нарушений 21
1.4. Роль провоспалительных цитокинов в исходах иммунного ответа при иксодовом клещевом боррелиозе 24
1.5. Пути апоптоза и пролиферации иммунокомпетентных клеток в ходе иммунного ответа на патоген и активационно-индуцированная клеточная смерть 28
Глава II. Материалы и методы исследования 36
2.1. Общая характеристика обследованных групп людей 36
2.2. Методы исследования 38
2.2.1. Получение культур мононуклеарных клеток периферической крови 38
2.2.2. Определение малонового диальдегида в плазме крови 39
2.2.3. Характеристика антигенов боррелий, использованных для стимуляции культур мононуклеарных клеток 41
2.2.4. Реакция бластной трансформации лимфоцитов 41
2.2.5. Анализ клеток с кариопатологией и патологическими формами митозов 42
2.2.6. Метод лазерной проточной цитометрии 42
2.2.6.1. Определение числа клеток в различных фазах клеточного цикла и состоянии апоптоза з
2.2.6.2. Определение числа клеток в состоянии апоптоза 43
2.2.7. Определение концентрации иммуноцитокинов в супернатан-тах 45
2.2.8. Цитогенетические методы 45
2.2.8.1. Хромосомный анализ 45
2.2.8.2. Дифференциальная окраска хромосом 46
2.3. Эксперименты в условиях in vitro 47
2.3.1. Изучение антиген-индуцированных цитогенетических нарушений и апоптоза в условиях in vitro 47
2.3.2. Изучение эффектов цитохалазина D на апоптотический ответ мононуклеарных клеток в условиях in vitro 48
2.4. Статистические методы 48
Глава III. Результаты собственных исследований
3.1. Кариопатологические изменения мононуклеарных клеток периферической крови больных иксодовым клещевым боррелиозом 50
3.1.1. Характеристика цитогенетических нарушений в лимфоцитах больных острым и хроническим иксодовым клещевым борре-лиозом 50
3.1.2. Полиморфизм хромосомы 9 в лимфоцитах периферической крови больных иксодовым клещевым боррелиозом 53
3.1.3. Экспериментальное моделирование цитогенетических нарушений, индуцированных в условиях in vitro корпускулярным антигеном боррелий в культурах мононуклеарных клеток здоровых доноров 57
3.1.4. Характеристика патологических форм митозов и кариопато-логических изменений в лимфоцитах больных острым и хроническим иксодовым клещевым боррелиозом 63
3.1.5. Экспериментальное моделирование патологии митоза, индуцированной в условиях in vitro корпускулярным антигеном боррелий в культурах мононуклеарных клеток здоровых до
норов 69
3.2. Пролиферация и апоптоз мононуклеарных клеток в условиях in vitro в ответ на стиму ляцию антигеном боррелий или неспецифическим митогеном у больных иксодовым клещевым боррелиозом 71
3.2.1. Характеристика бластной трансформации лимфоцитов в ответ на корпускулярный боррелиозный антиген у больных различными клиническими формами острого иксодового клещевого боррелиоза 71
3.2.2. Сравнительная характеристика реакции бластной трансформации лимфоцитов в ответ на стимуляцию корпускулярным антигеном боррелий или неспецифическим митогеном у больных острым и хроническим иксодовым клещевым борре лиозом
3.2.3. Характеристика пролиферации и апоптоза мононуклеарных клеток периферической крови больных иксодовым клещевым боррелиозом в ответ на стимуляцию корпускулярным антиге
ном боррелий в условиях in vitro с использованием метода проточной цитометрии
3.2.4. Экспериментальное моделирование апоптоза, индуцированного в условиях in vitro инактивированным корпускулярным антигеном боррелий, в культурах мононуклеарных клеток здоровых доноров
3.2.5. Характеристика пролиферации и апоптоза мононуклеарных клеток периферической крови больных иксодовым клещевым боррелиозом в ответ на стимуляцию неспецифическим мито
геном в условиях in vitro с использованием метода проточной цитометрии 5
3.3. Характеристика продукции цитокинов моно-нуклеарными клетками в ответ на стимуляцию корпускулярным антигеном боррелий или неспецифическим митогеном в условиях in vitro у больных иксодовым клещевым бор-релиозом 92
3.4. Концентрация малонового диальдегида в плазме крови больных иксодовым клещевым боррелиозом 97
ГЛАВА IV. Обсуждение результатов собственных исследований 99
4.1. Кариопатологические изменения в лимфоцитах периферической крови больных иксодовым клещевым боррелиозом 99
4.2. Апоптоз и пролиферативный ответ мононуклеарных клеток периферической крови больных иксодовым клещевым боррелиозом 108
Выводы 116
Список сокращений и условных обозначений 118
Список литературы
