Введение
1 Обзор литературы
1.1 Синтез мелатонина 10
1.2 Мелатонин - мультифункциональное соединение 10
1.3 Локальные функции мелатонина 13
1.3.1 Сетчатка 13
1.3.2 Слизистая оболочка кишечника 14
1.3.3 Кожные покровы 14
1.3.4 Клетки крови 15
1.4 Мелатонин -как фармакологический агент. 16
1.5 Распад 17
1.5.1 Структура молекулы мелатонина 22
1.5.2 Активированные кислородные метаболиты
1.5.2.1 Супероксид-анион радикал (02*~) 23
1.5.2.2 Перекись водорода (Н202) 24
1.5.2.3 Гидроксильный радикал (НО*) 26
1.5.2.4 Синглетный кислород (02) 27
1.5.3 Другие окислители неферменгативной природы 29
1.5.4 Окислители ферментативной природы
1.5.4.1 Индоламин-2,3-диоксигеназа (ИДО) 29
1.5.4.2 Миелопероксидаза (МПО) 30
1.5.4.3 ЦитохромС 31
1.5.5 Системы ex vivo 32
1.6 АФМК и АМК- факты и перспективы 33
1.7 Резюме 34
2 Материалы и методы
2.1 Экспериментальные животные 35
2.2 Реактивы 35
2.3 Оборудование 36
2.4 Методы
2.4.1 Синтез, очистка и идентификация АФМК 37
2.4.2 Определение содержания мелатонина, АФМК и АМК с помощью ВЭЖХ 38
2.4.3 Методы экстракции анализируемых веществ 39
2.4.4 Определение АФМК и АМК в крови и сетчатке крыс 41
2.4.5 Определение содержания АФМК в спинномозговой жидкости крыс методом микродиализа in vivo 41
2.4.6 Определение мелатонина АФМК и АМК в крови, сетчатке и эпифизе цыплят и изучение их кинетики 43
2.5 Получение и обработка данных 44
3 Результаты
3.1 Определение спектральных характеристик продукта окисления мелатонина перекисью водорода 45
3.2 Масс-спектрометрический анализ 47
3.3 Экстракция и анализ предполагаемых метаболитов мелатонина в биологическом материале с помощью ВЭЖХ 48
3.4 Определение содержания мелатонина, АФМК и АМК в крови, сетчатке и эпифизе цыплят и изучение их кинетики 52
3.5 Определение содержания АФМК в крови и сетчатке крыс 57
3.6 Определение содержания АФМК в спинномозговой жидкости крыс методом микродиализа in vivo 60
4 Обсуждение 62
5 Выводы 73
6 Список литературы 74
