Введение
ГЛАВА 1 Обзор литературы 18
1.1.Общие сведения о микроэлементах 18
1.2.Механизмы токсичности металлов 18
1.3. Токсикокинетика металлов .23
1.4. Общие аналитические методы исследования
содержания металлов в биологических объектах 26
1.5. Критерии выбора методов анализа 30
1.6. Выбор объектов для целей судебно-химического исследования 32
1.7. Выбор метода пробоподготовки образцов .35
1.8. Комплексная оптимизация условий
атомно-абсорбционного анализа .36
1.9. Токсикологическая характеристика цинка 36
1.9.1. Биологические функции цинка 37
1.9.2. Концентрация цинка в органах и тканях человека в норме .38
1.9.3. Токсичность соединений цинка 39
1.9.4. Особенности токсикокинетики цинка 40
1.10. Токсикологическая характеристика свинца .42
1.10.1. Общие сведения 42
1.10.2. Механизмы общетоксического действия свинца на организм .43
1.10.3. Токсикокинетика свинца 47
1.11. Биомаркеры – биологические индикаторы действия металлов 48
1.11.1. Классификация металлотионеинов .48
1.11.2. Структура металлотионеинов 49
1.11.3. Функции металлотионеинов 50
1.11.4.Аналитические методы обнаружения и определения металлотионеинов .51
1.12. Судебно-медицинская оценка воздействия металлов на организм человека .51
1.13. Патоморфологические изменения органов и тканей,
вызываемые воздействием соединений свинца и цинка 53
ГЛАВА 2 Материалы и методы исследования 57
2.1 Описание животных .57
2.2. Дизайн исследования .58
2.3. Описание воздействия на животных. Моделирование острого отравления соединениями свинца и цинка 60
2.4. Объекты исследования 60
2.5. Отбор, хранение и подготовка биологических проб 61
2.6. Унифицированная методика подготовки проб с различной жировой основой к атомно-абсорбционному измерению 62
2.7. Подготовка проб при определении ионных
форм свинца и цинка в образцах печени и почки .63
2.8. Оборудование для пробоподготовки и определения концентрации свинца и цинка .64
2.9. Реактивы и вспомогательные материалы
2.10. Построение градуировочных графиков .66
2.11. Выполнение измерений 68
2.12. Обработка результатов анализа, расчет содержания элементов в образцах 70
2.13. Иммуногистохимическое исследование 71
2.14. Гистологическое исследование 72
2.15. Валидационная оценка аналитических методик 74
2.16. Методы статистической обработки результатов исследований 76
ГЛАВА 3. Результаты собственных исследований 78
3.1. Определение концентрации свинца и цинка методом атомно-абсорбционной спектрометрии 78
3.1.1. Результаты подбора условий для исследования 78
3.1.2. Результаты определения валового содержания свинца и цинка в объектах исследования 80
3.1.3. Результаты проверки правильности и воспроизводимости методики определения свинца и цинка .82
3.2. Результаты исследования динамики распределения цинка и свинца в различных органах и тканях крыс 84
3.2.1. Распределение цинка .84
3.2.2. Распределение свинца 88
3.3. Результаты исследования распределения цинка в тканях печени, почек и межклеточной жидкости .93
3.4. Результаты исследования воздействия свинца на распределение цинка в органах и тканях крыс 93
3.5. Результаты атомно-абсорбционного определения натрия для исследования степени токсического поражения органов животных соединениями свинца 96
3.6. Результаты гистологического исследования тканей 97
3.6.1. Обзорная микроскопия .98
3.6.2. Морфометрическое исследование почки 103
3.6.3. Морфометрическое исследование печени 105
3.7. Результаты выявления экспрессии металлотионеина иммуногистохимическим методом .106
3.8. Заключение 111
ГЛАВА 4. Обсуждение полученных результатов 112
4.1. Применение атомно-абсорбционной спектрометрии в качестве метода доказательной медицины 112
4.2. Обсуждение результатов проверки правильности и воспроизводимости методики определения свинца и цинка 116
4.3. Динамика накопления микроэлементов в организме экспериментальных животных 117
4.4. Связь элементного статуса со структурными изменениями почек и печени .120
4.5. Функциональное состояние и морфология органов детоксификации и выведения в зависимости от токсиканта .120
4.6. Экспрессия металлотионеина-1 в органах крысы при интоксикации цинком и свинцом 123
Заключение 126
Выводы .131
Научно-практические рекомендации 133
Список основных сокращений 134 список литературы .
