Введение
Глава 1. Электронно-возбужденные состояния в бактериальной люминесценции .
1.1. Ферментативные хемилюминесцентные реакции светящихся организмов 15
1.2. Механизмы формирования электронно-возбужденных состояний хемштюминесцентной ферментативной реакции
1.2.1. Химические процессы, предшествующие стадии электронного возбуждения 18
1.2.2. Взаимодействие субстратов с ферментами в надмолекулярных структурах 24
1.2.3. Стадия формирования электронно-возбужденных состояний 36
1.3. Возможность заселения высших электронно-колебательных
состояний эмиттера
1.3.1. Закономерности внутримолекулярной миграции энергии возбуждения в эмиттере 43
1.3.2. Формирование электронно-возбужденных состояний в хемилюминесцентных процессах * 63
1.3.3. Заселение высших электронно-возбужденных состояний эмиттера в биолюминесцентном процессе 74
1.4. Эффективность элементарных физико-химических процессов в биолюминесцентной реакции 78
1.4.1. Механизмы переноса энергии электронного возбуждения в люминесцентных системах. Природа донора и акцептора 79
1.4.2. Миграция электрона в биолюминесцентных системах 94
1.4.3. Миграция водорода (№=е" + Н^) в биолюминесцентной системе 96
1.5. Применение спектроскопии с временным разрешением для изучения межмолекулярных взаимодействий 101
1.6. Использование системы сопряженных ферментативных реакций качестве люминесцентного биотеста 105
Заключение по 1 главе 122
Глава 2. Методика эксперимента
2.1. Реактивы , 126
2.2. Методы измерения.
2.2.1. Регистрация кинетики биолюминесценции 127
2.2.2. Регистрация флуоресценции при стационарном возбуждении ... 129
2.2.3. Флуоресценция с временным разрешением.., 133
2.2.4. Измерения оптической плотности растворов 140
2.3. Обработка данных.
2.3.1. Обработка данных биолюминесцентного анализа 142
2.3.2. Флуоресценция при постоянном возбуждении 143
2.3.3. Спад флуоресценции и анизотропии флуоресценции 144
2.3.4. Расчет скоростей окисления НАДН 145
2.4. Характеристики исследуемых экзогенных соединений 145
Глава 3. Изучение заселенности электронно- возбужденных состояний эмиттера 150
3.1.. Экспериментальное доказательство заселения высших электронно-возбужденных состояний эмиттера с использованием экзогенных молекулярных акцепторов энергии.. 154
3.2. Изучение возможности резонансной миграции энергии в системе: эмиттер биолюминесценции - гидрофобная молекула ... 15
3.3. Дезактивация флуоресцентных состояний эмиттера (Si*) в присутствии молекулярных акцепторов энергии 174
3.4. Внешний эффект тяжелого атома в биолюминесцентной системе. 183
Глава 4. Скорость дезактивации флуоресцентных состояний эмиттера и влияние экзогенных соединений на электроную плотность 193
Глава 5. Скорость доз активации флуоресцентных состояний эмиттера и влияние соединений с различным редокс-потенциалом на перенос водорода (Н> е + Н+) 202
5.1.. Влияние редокс-активных соединений на систему сопряженных реакций, катализируемых НАД(Ф)Н:ФМН-оксидоредуктазой и люциферазой 203
5.2. Кинетические и термодинамические характеристики реакций окисления НАДН экзогенными соединениями. 208
5.3. Действие органических окислителей на процессы миграции водорода в полиферментных биолюминесцентных системах 222
5.4 Присутствие экзогенного низкомолекулярного окислителя в биолюминесцентной системе 237
Глава 6. Исследование взаимодействий экзогенных соединений с ферментами методами спектроскопии с временным разрешением 242
6.1. Взаимодействие с ферментами ксантеновых красителей, включающих атомы галоидов разной массы 243
6.2. Взаимодействие иефлуоресцентных окислителей с ферментами. 252
6.3. Взаимодействия ферментов из набора люминесцентных биотестов с экзогенными флуоресцентными соединениями 266
Глава 7. Применение закономерностей воздействия на иолюминесценцию экзогенных соединений для люминесцентного тестирования 272
7.1. Действие солей металлов на биолюминесцентные системы различной сложности 273
Действие редокс-активных соединений на биолюминесцентные системы различной сложности 280
Заключение 288
Выводы 290
Литература
