Введение
ГЛАВА 1. Гемолитическая активность холерных вибрионов. обзор литературы 16
1.1. Гемолитическая активность в эволюции возбудителя холеры 16
1.2. Проблемы очистки и характеристики препаратов гемолизинов 26
1.2.1. Методы очистки гемолизинов холерных вибрионов . 26
1.2.2. Механизм действия гемолизинов холерных вибрионов как токсинов каналоформеров 47
1.2.3. Организация и экспрессия генов, детерминирующих синтез гемолизина холерных вибрионов 54
Собственные исследования 63
ГЛАВА 2. Ферменты в гемолитической активности холерных вибрионов 63
2.1. Компьютерный анализ нуклеотидных и аминокислотных последовательностей структурных генов, составляющих hly область генома холерных вибрионов и их продуктов 63
2.1.1. Компьютерный анализ аминокислотной последовательности олипептида, продукта гена ЫуА 64
2.1.2. Компьютерный анализ аминокислотной последовательности полипептида, продукта гена 1ес 69
2.1.3. Компьютерный анализ аминокислотной последовательности полипептида, продукта гена ЫуВ 71
2.1.4. Компьютерный анализ аминокислотной последовательности полипептида, продукта гена ЫуС . 73
2.2. Детекция ферментативных активностей в препаратах гемолизинов, полученных с помощью многоэтапных схем очистки 78
2.3. Двухэтапная схема очистки гемолизина холерных вибрионов, детекция ферментативных активностей фракций препарата 90
ГЛАВА 3. Роль триацилглицероллипазы и лецитиназы в гемолитической активности холерных вибрионов 101
3.1. Разработка питательной среды для выявления триацилглицероллипазной активности холерных вибрионов 101
3.2. Конструирование антилипазного полимерного иммуноглобулинового диагностикума на основе коммерческого препарата липазы Pseudomonas sp. фирмы «Sigma» для изучения липазной активности холерных вибрионов... 110
3.3. Роль лецитиназы в гемолитической активности холерных вибрионов... 120
ГЛАВА 4. Биологическая функция гена hly а, детерминирующего продукцию лектина 124
4.1. Общие сведения о лектинах 124
4.2. Углеводная специфичность лектина (Н1у А), выявленная в реакции торможения гемолиза 131
4.3. Участие галактозоспецифичного лектина в агглютинации эритроцитов токсигенными и атоксигенными штаммами холерных вибрионов 140
4.4. Метод осмотической протекции в изучении механизма действия гемолизинов 145
4.5. Углеводная специфичность некоторых лектиновых рецепторов холерных
вибрионов в процессе адгезии (на модели эритроцитов) : 154
ГЛАВА 5. Действие гемолизина на клетки микроорганизмов 172
5.1. Изучение влияния препаратов гемолизина на рост клеток грам +, грам" бактерий 174
5.2. Ультраструктурные изменения холерных вибрионов при действии гемолизина из штамма V. cholerae не 01 Р 11702 187
ГЛАВА 6. Функциональная организация и механизмы гемолитической активности холерных вибрионов 197
6.1. Гемолитическая активность холерных вибрионов эльтор . 197
6.2. Гемолитическая активность классических холерных вибрионов 205
6.3. Гемолиз и биологические мембраны 207
Заключение 215
Выводы 225
Литература 227
