Введение
ГЛАВА 1. Обзор литературы 11
1.1. S. cerevisiae как возможная модель для исследования процессов старения на клеточном уровне 11
1.2. Регуляция гликолиза и метаболизма запасных углеводов в дрожжах S. cerevisiae 24
1.3. Регуляция ключевых ферментов цикла Кребса в клетках дрожжей S. cerevisiae 29
1.4. Полифосфаты. Строение, локализация, функции в клетках дрожжей S. cerevisiae 33
ГЛАВА 2. Материалы и методы исследования 37
2.1. Объект исследования и условия его культивирования 37
2.2. Методы контроля роста и определение интенсивности дыхания 37
2.3. Определение жизнеспособности клеток и моделирование хронологического старения 38
2.4. Разрушение клеток и получение грубого гомогената 39
2.5. Определение потребления глюкозы 39
2.6. Определение активности ферментов 40
2.7. Определение ТБК-активных продуктов 42
2.8. Определение гликогена и трегалозы 42
2.9. Определение полифосфатов 43
2.9.1. Определение аккумуляции в клетках ВХКД 45
2.9.2. Определение карбонильных групп белков 45
2.9.3. Статистическая обработка данных 46
ГЛАВА 3. Результаты и их обсуждение 47
3.1. Исследование влияния замены среды на исследуемые параметры 47
3.2. Определение маркеров старения в клетках дрожжей S. cerevisiae 48
3.3. Исследование метаболических изменений в стареющих дрожжах S. cerevisiae с анаэробным типом метаболизма 50
3.4. Исследование метаболических изменений в стареющих дрожжах S. cerevisiae с аэробным типом метаболизма 56
3.5. Динамика содержания неорганических полифосфатов в клетках стареющей культуры S. cerevisiae 67
Заключение 71
Выводы 75
Список использованной литературы 76
Приложение 96
