Введение
Глава 1. Общая характеристика цианобактерий 9
1. Морфология, классификация и распространение в природе 9
2. Особенности метаболизма 12
3. Адаптация к недостатку питательных элементов в среде 15
Глава 2. Молекулярный водород в метаболизме микроорганизмов 17
1. Гидрогеназы 18
2. Метаболизм Нг у цианобактерий 26
2.1. Поглощающая гидрогеназа 28
2.2. Нитрогеназы 34
Глава 3. Обратимая гидрогеназа цианобактерий 37
1. Распространение и физиологическое значение 37
2. Организация генов и их экспрессия 41
3. Регуляция активности и синтеза 45
4. Биохимические и каталитические свойства 48
Глава 4. Объекты и методы исследования 53
1. Организмы и условия их культивирования 53
2. Методы исследования 57
2.1. Определение ростовых параметров 57
2.2. Определение гидрогеназной активности 58
2.3. Определение скорости образования и поглощения Н2 интактными клетками 59
2.4. Получение бесклеточных экстрактов и частичная очистка гидрогеназы 59
2.5. Аналитические методы 60
2.6. Молекулярно-биологические методы 60
2.6.1.ОчисткаДНКиРНК 60
2.6.2. Расщепление ДНК рестрикционными эндонуклеазами и электрофорез в агарозном геле 62
2.6.3 Создание праймеров и полимеразные цепные реакции 62
2.6.4. Гибридизация по Саузерну 63
2.6.5. Клонирование и создание частичных библиотек генов 65
2.6.6. Определение и анализ последовательностей нуклеотидов 66
2.7. Другие методы 71
2.8. Обработка данных и воспроизводимость измерений 71
Глава 5. Гидрогеназная активность G. alpicola 72
1. Влияние света и Ог 73
2. Влияние обеспеченности культуры азотом 74
3. Физиологические реакции гидрогеназы 79
Глава 6. Молекулярно-генетические свойства гидрогеназы G. alpicola 84
1. Идентификация и характеристика генов, кодирующих гидрогеназу G. alpicola 84
2. Анализ транскрипции hoxHn hoxYb условиях, благоприятных для развития
гидрогеназной активности 90
Глава 7. Каталитические свойства изолированной гидрогеназы G. alpicola 94
Глава 8. Метаболизм Нг у С. thermalis 104
1. Рост культуры и гидрогеназная активность 104
2. Идентификация и характеристика генов, кодирующих гидрогеназу С. thermalis 107
Глава 9. Обсуждение результатов 111
Выводы 118
Литература 120
Публикации по теме диссертации 140
