Введение
Обзор литературы 8
Генерация АФК дыхательной цепью митохондрий 8
Генерация АФК в комплексе 1 9
Генерация АФК в комплексе III 12
Механизмы адаптации к окислительному стрессу 15
Влияние АФК на сигнальные каскады и клеточную гибель 18
Морфология митохондриалыюго ретикулума 23
Белки, участвующие в слиянии митохондрий 24
Модель слияния митохондрий 31
Фрагментация митохондрий 34
Взаимодействие белков участвующих во фрагментации митохондрий 36
Регуляция белков участвующих во фрагментации митохондрий 39
Фрагментация митохондрий при апоптозе 40
Избирательное уничтожение митохондрий («митоптоз») 42
Избирательное уничтожение митохондрий в процессе дифференцировки 44
а) Участие 15-липоксигеназы 44
б) Убиквитирование и АТФ зависимый протеолиз 45
в) Аутофагия и экзоцитоз митохондрий 46
Избирательное уничтожение митохондрий при патологиях 48
Избирательное уничтожение митохондрий в процессе запрофаммированной гибели клеток 49
Аутофагия 52
Механизм формирования аутофагосом 56
Аутофагия при патологиях 58
Маркеры, определяющие специфичность аутофагии митохондрий 60
Объекты и методы исследования 62
Объект исследования 62
Замораживание и размораживание клеток 62
Трансфекция клеток 62
Регистрация дыхания клеток 63
Визуализация митохондрий, аутофагосом и цитоскелета 64
Определение клеточной гибели 64
Электронная микроскопия 66
Сканирующая электронная микроскопия 66
Измерение продукции АФК и мембранного потенциала 66
Измерение концентрации пероксида водорода 67
Результаты исследования 68
Характеристика клеток линии HeLa 68
Индукция гибели клеток HeLa пероксидом водорода 69
Пероксид водорода стимулирует митохондриальную продукцию АФК 73
Участие митохондриальных АФК в передаче апоптозного сигнала между клетками 75
Окислительный стресс вызывает фрагментацию митохондриального ретикулума 82
Деградация поврежденных митохондрий при окислительном стрессе 84
Обсуждение 99
Выводы 114
Список литературы 116
