Введение
ГЛАВА 1. Иммобилизация биокатализаторов 12
1.1. Микробная конверсия нитрилов карбоновых кислот 12
1.2. Преимущества иммобилизации 14
1.3. Классификация методов иммобилизации 15
1.4. Иммобилизация на поверхности материала носителя 16
1.5. Углеродные сорбенты как носители для иммобилизации микроорганизмов 23
1.6. Иммобилизация клеток в массе носителя 25
1.7. Иммобилизация клеток с использованием мембранной технологии 32
ГЛАВА 2. Объекты и методы исследования 38
2.1. Бактериальные штаммы 38
2.2. Среды культивирования 39
2.3. Носители для адсорбционной иммобилизации 39
2.4. Условия культивирования бактерий и определение ростовых характеристик 42
2.5. Определение активности нитрилгидратазы 42
2.6. Определение сорбционной емкости носителей по отношению к субстрату и продукту нитрилгидратазной реакции 43
2.7. Определение операционной стабильности иммобилизованных клеток и клеток в суспензии 44
2.8. Адсорбционная иммобилизация клеток бактерий 45
2.9. Иммобилизация бактериальных клеток включением в гель 45
2.10. Ковалентная иммобилизация бактериальных клеток 46
2.11. Микроскопия 47
2.12. Статистическая обработка 47
ГЛАВА 3. Иммобилизация клеток актиновактерий рода rhodococcus на углеродных сорбентах 48
3.1. Морфология клеток родококков, выращенных на минимальной и полноценной средах 48
3.2. Сорбционная емкость углеродных сорбентов по отношению к клеткам бактерий 54
3.3. Сорбционная емкость углеродных сорбентов по отношению к субстрату и продукту нитрилгидратазной реакции 56
3.4. Электронно-микроскопическое изучение адсорбции клеток родококков на углеродных носителях 59
3.5. Нитрилгидратазная активность адсорбированных клеток родококков 64
3.6. Рост штамма R. ruber gtl на углеродных сорбентах и образование акриламида иммобилизованными клетками 66
3.7. Операционная стабильность биокатализатора, иммобилизованного на углеродных сорбентах 69
3.8. Влияние повышенной температуры на нитрилгидратазную активность клеток R. ruber gtl, иммобилизованных на БАУ 73
ГЛАВА 4. Иммобилизация клеток актинобактерий рода rhodococcus на новых углеродсодержащих носителях 78
4.1. Сорбционная емкость новых углеродсодержащих носителей по отношению к клеткам родококков и акриламиду 78
4.2. Нитрилгидратазная активность и операционная стабильность клеток родококков, адсорбированных на новых углеродсодержащих носителях 79
4.3. Рост клеток штамма R. ruber gtl на новых углеродсодержащих носителях 83
4.4. Электронно-микроскопическое изучение клеток родококков, адсорбированных на новых углеродсодержащих носителях 85
ГЛАВА 5. Иммобилизация клеток актинобактерии рода rhodococcus методами: включения в гель, металлохелатным и ковалентного связывания с носителем 88
5.1. Скорость нитрилгидратазной реакции и операционная стабильность клеток родококков, включенных в гели альгината бария и кальция 88
5.2. Сохранение нитрилгидратазной активности клеток родококков, иммобилизованных включением в гели к-каррагинана и агара 90
5.3. Иммобилизация клеток родококков включением в ковалентно сшитый ПААГ 91
5.4. Связывание клеток родококков с силикагелем, активированным хлоридом хрома 111) 92
5.5. Хелатирование клеток родококков гидрооксидом титана (IV) 94
5.6. Иммобилизация клеток родококков на полиамиде, активированном глутаральдегидом 95
Заключение 99
Выводы 107
Список литературы 109
