Введение
1. Обзор литературы 11
1.1. Эритроциты. Общие сведения 11
1.1.1. Структура эритроцитов 11
1.1.2. Метаболизм и ионный баланс 12
1.1.3. Структура и функции гемоглобина 13
1.2. Активные формы кислорода 15
1.3. Факторы, вызывающие окислительный стресс в эритроцитах 18
1.3.1. Аутоокисление гемоглобина 18
1.3.2. Фагоциты как источник активных форм кислорода 19
1.3.3. Реакции эритроцитов с ксенобиотиками 20
1.4. Биохимические основы защиты эритроцитов от окислительного стресса. Эндогенные антиоксиданты 21
1.5. Модификация эритроцитов под действием окислителей 24
1.5.1. Перекисное окисление липидов 24
1.5.2. Окисление тиоловых групп белков 25
1.5.3. Действие окислительного стресса на механизмы ионного транспорта 26
1.5.4. Образование гемихромов и высвобождение гемма. Повреждение мембран эритроцитов под действием свободного гемма 29
1.5.5. Изменение деформируемости 33
1.5.6. Экзогенные антиоксиданты и их применение в качестве
лечебных препаратов 33
1.7. Методы,применяемые для оценки активности антиоксидантов 35
2. Материалы и методы 38
2.1. Материалы 38
2.2. Методы исследования 38
2.2.1. Подготовка суспензии эритроцитов 38
2.2.2. Модификация эритроцитов с помощью окислительных воздействий 39
2.2.3. Определение распределения эритроцитов по плотности 39
2.2.4. Определение распределения эритроцитов по осмотической резистентности. Расчет изменения объема эритроцита 40
2.2.5. Измерение образования активных форм кислорода 42
2.2.6. Определение накопления метгемоглобина 43
2.2.7. Измерение преципитации гемоглобина 43
2.2.8. Определение содержания восстановленного глутатиона 43
2.2.9. Оценка перекисного окисления липидов 44
2.2.10. Измерение гемолиза 45
2.3. Статистическая обработка экспериментальных данных 45
3. Результаты исследований 46
3.1. Влияние окислительной системы феназинметосульфат — аскорбат на эритроциты человека 46
3.1.1. Окисление гемоглобина 46
3.1.2. Внутриклеточное образование активных форм кислорода 47
3.1.3. Влияние окислительной системы феназинметосульфат—аскорбат
на объемные параметры эритроцитов. Активация Гардос-каналов 49
3.1.4. Влияние антиоксидантов на продукцию активных форм кислорода
и на изменение осмотической резистентности эритроцитов 56
3.2. Влияние третбутиловой гидроперекиси на эритроциты человека 59
3.2.1. Внутриклеточное образование активных форм кислорода 59
3.2.2. Влияние третбутиловой гидроперекиси на объемные параметры эритроцитов. Активация Гардос-каналов 61
3.2.3. Влияние третбутиловой гидроперекиси на осмотическую резистентность эритроцитов. Эффект клотримазола в бескальциевой среде 66
3.2.4. Действие кальция и клотримазола на индуцированный третбутиловой гидроперекисью гемолиз эритроцитов 68
3.2.5. Действие клотримазола на окислительно-восстановительный статус эритроцитов, подвергнутых окислению в присутствии третбутиловой гидроперекиси 71
3.2.6. Влияние антиоксидантов на внутриклеточную продукцию актив
ных форм кислорода 76
3.2.7. Влияние антиоксидантов на гемолиз эритроцитов 77
3.3. Метод оценки антиоксидантной активности 78
4. Обсуждение полученных результатов 81
Выводы 90
Список цитируемой литературы
