Введение
Глава 1. Обзор литературы 10
1. Липолитические ферменты 10
1.1. Липаза из поджелудочной железы свиньи 10
1.2. Липаза из гриба рода Mucor 12
1.3. Липаза, выделенная из бактерий рода Pseudomonas 13
1.4. Кинетика липолиза 14
2. Общие принципы иммобилизации ферментов 19
2.1. Носители для иммобилизации ферментов 20
2.2. Методы иммобилизации ферментов 22
3. Особенности иммобилизации липаз 29
3.1. Адсорбция 30
3.2. Ковалентная иммобилизация липаз 34
3.3. Включение или микрокапсулирование 36
Глава 2. Материалы и методы 41
1. Перечень используемых реактивов 41
2. Методики приготовления растворов 42
2.1. Приготовление рабочего раствора субстрата 43
2.2. Приготовление растворов липаз 43
2.3. Приготовление растворов полиэлектролитов 43
3. Методы и приборы 44
3.1. Методы и аппаратура для измерения активности липаз 44
3.2. Исследование липазы в комплексах с полиэлектролитами методом межфазной тензиометрии 46
4. Статистическая обработка результатов 51
Глава 3. Результаты собственных исследований и их обсуждение 53
1. Влияние белкового окружения на активность липаз из различных источников 53
2. Влияние полиэлектролитного окружения на активность липаз из поджелудочной железы свиньи и гриба Mucorjavanicus 56
3. Регуляция активности липаз путем направленного изменения условий среды 61
3.1. Влияние рН среды на активность липаз из поджелудочной железы свиньи и гриба Mucorjavanicus 61
3.2. Влияние температуры на активность липаз из поджелудочной железы свиньи и гриба Mucorjavanicus 62
3.3. Влияние температуры на активность липаз в комплексе с синтетическими полиэлектролитами 64
3.3.1. Изменение активности липазы из поджелудочной железы свиньи в комплексе с полиэлектролитами при увеличении температуры 65
3.3.2. Изменение активности липазы из гриба Mucor javanicus в комплексе с полиэлектролитами при увеличении температуры 68
4. Изучение динамического поверхностного натяжения систем липазы из поджелудочной железы свиньи с природными и синтетическими полиэлектролитами 71
4.1. Измерение динамического поверхностного натяжения растворов липазы из поджелудочной железы свиньи в смеси с природным полимером - бычьим сывороточным альбумином 72
4.2. Измерение динамического поверхностного натяжения растворов липазы из поджелудочной железы свиньи в смеси с поли-L-глутаминовой кислотой 77
4.3. Измерение динамического поверхностного натяжения растворов липазы из поджелудочной железы свиньи в смеси с поли-L-лизином 80
4.4. Измерение динамического поверхностного натяжения растворов липазы из поджелудочной железы свиньи в трехкомпонентном комплексе с поли-Ь-лизином и поли-L- глутаминовой кислотой 84
4.5. Измерение динамического поверхностного натяжения растворов липазы из поджелудочной железы свиньи в смеси с полистиролсульфонатом натрия 85
4.6. Измерение динамического поверхностного натяжения растворов липазы из поджелудочной железы свиньи в смеси с полидиаллилдиметиламмоний хлоридом 88
4.7. Измерение динамического поверхностного натяжения растворов липазы из поджелудочной железы свиньи в трехкомпонентном комплексе с полистиролсульфонатом натрия и полидиаллидиметиламмоний хлоридом 92
5. Модели ферментативных супрамолекулярных наноразмерных систем 93
Выводы 98
Список литературы 99
Приложение 117
