Введение
ГЛАВА 1. Обзор литературы
1.1 Костный мозг как источник клеток-предшественников неоваскулогенеза 11
1.2 Особенности эмбриогенеза сосудистой системы 17
1.2.1 Эндотелиальные клетки во время эмбрионального развития 17
1.2.2 Формирование первичного капиллярного сплетения 20
1.2.3 Ремоделирование капиллярного сплетения в артерии и вены 21
1.2.4 Молекулярные маркеры эндотелиальных клеток 22
1.3 Формирование сосудов и ангиогенные факторы 24
1.3.1 Модель формирования сосудов 24
1.3.2 Вазо-эндотелиальные факторы роста - их разновидности и рецепторы 25 1.3.3.PeryjMin«[VEGF , 28
1.3.4 Ангиопоэтины и их Tie-рецепторы 30
1.3.5 Angl и стабилизация клеточной стенки 31
1.3.6 Ang2: агонист или антагонист? 33
1.4 Лектины 35
1.5 Резюме 36
ГЛАВА 2. Материал и методы исследования
2.1 Общая структура эксперимента 38
2.2 Характеристика материала 38
2.3 Моделирование хронической ишемической болезни сердца 39
2.4 Получение мононуклеарной фракции аутологичных клеток костного мозга и разделение ее на фракции 41
2.5 Морфологическое исследование образцов. 43
2.6 Иммуногистохимические и иммуноцитохимические методы исследования 44
2.7 Молекулярные методы исследования 45
2.8 Проточная цитофлюориметрия 49
2.9 Исследование фракций МНК КМ после культивирования
в средах направленной клеточной дифференцировки 49
2.10 Оценка перфузии миокарда с использованием 99шТс 50
2.11 Статистические методы исследования 50
ГЛАВА 3. Результаты исследования
3.1 Морфологический анализ миокарда при моделировании хронической ишемической болезни сердца 51
3.2 Морфологический анализ миокарда при моделировании хронической ишемической болезни сердца после имплантации прилипающих клеток мононуклеарной фракции костного мозга 53
3.3 Морфологический анализ миокарда при моделировании хронической ишемической болезни сердца после имплантации неприлипающих клеток мононуклеарной фракции костного мозга в лазерные каналы 59
3.4 Морфометрический анализ миокарда при проведении реваскуляризации 63
3.5 Проточный цитофлюориметрический анализ популяций клеток 63
3.6 Оценка уровня экспрессии генов-маркеров хондро-остеогенеза 66
3.7 Оценка уровня экспрессии генов вазо-эндотелиальных факторов роста в сепарированных мононуклеарных клетках костного мозга 70
3.8 Исследование уровня экспрессии мРНК генов VEGF-A
и SDF в ишемизированном миокарде и зонах реваскуляризации 71
3.9 Иммуноцитологическое исследование клеточных популяций в средах направленной дифференцировки 72
3.10 Анализ перфузии миокарда по данным сцинтиграфии после операции комплексной реваскуляризации 74
ГЛАВА 4. Обсуждение результатов
Выводы
Практические рекомендации
Список литературы
