Введение
Глава 1. Аналитический обзор литературы 13
1.1. Ранние изменения при ишемии головного мозга 13
1.2. Воспаление и глиальная реакция 15
1.2.1. Воспаление 16
1.2.2. Глиальная реакция 20
1.3. Реорганизация ткани после ишемического инсульта. Ограниченная репарация в головном мозге . 24
1.4. Зона ишемической полутени 29
1.5. Современные методы лечения инсульта 30
1.5.1 Улучшение перфузии 31
1.5.2 Нейропротекция 32
1.5.3. Клеточная терапия инсульта 34
1.5.4 Мезенхимные стволовые клетки как агент клеточной терапии 39
Глава 2. Материал и методы исследования 49
2.1. Эксперименты in vitro 49
2.1.1 Выделение и культивирование мезенхимных стволовых клеток из стромы костного мозга крыс 49
2.1.2. Фенотипирование мезенхимных стволовых клеток крыс 49
2.1.3. Дифференцировка in vitro в ортодоксальных направлениях 50
2.1.4. Дифференцировка in vitro в нейрональном направлении 53
2.1.5. Окрашивание мезенхимных стволовых клеток крыс флуорохромом РКН 26 53
2.2. Эксперименты in vivo 54
2.2.1. Введение МСК в мозг интактным животным 54
2.2.2. Моделирование экспериментального ишемического инсульта головного мозга 54
2.2.3. Введение МСК животным с экспериментальным инсультом 57
2.2.4. Фиксация тканей головного мозга 57
2.2.5. Выявление флуоресцентно меченых МСК в тканях головного мозга 57
2.2.6. Морфологический анализ тканей головного мозга 58
2.2.7. Иммуногистохимическое окрашивание срезов головного мозга 58
2.2.8. Морфометрическая оценка объема дефекта головного мозга и количества сосудов в поврежденном и неповрежденном полушарии 61
2.2.9. Поведенческое тестирование животных в водном лабиринте Морриса 62
Глава 3. Результаты исследований 63
3.1. Характеристики МСК крысы in vitro 63
3.1.1. Фенотипирование МСК 63
3.1.2. Дифференцировка МСК в ортодоксальных направлениях in vitro 64
3.1.3. Дифференцировка MCK в нейрональном направлении in vitro 67
3.1.4. Окрашивание клеток флуорохромом РКН 26 69
3.2. Характеристика головного мозга после локального введения МСК в мозг интактных крыс 70
3.3. Морфологическая характеристика головного мозга крысы после экспериментального ишемического инсульта 76
3.3.1. Распределение меченых флуорохромом РКН 26 клеток в ткани мозга 76
3.3.2. Характеристика структуры головного мозга ложнооперированных животных 78
3.3.3. Характеристика структуры головного мозга после окклюзии средней мозговой артерии (группа контроля) 79
3.3.4. Характеристика структуры головного мозга после окклюзии средней мозговой артерии
(группа клеточной терапии) 108
3.3.5. Морфометрическое исследование головного мозга 127
3.3.6. Поведенческое тестирование животных 130
Глава 4. Обсуждение полученных результатов 132
Выводы 153
Список работ, обубликованных по теме диссертации 154
Список литературы
