Введение
Глава 1. Литературный Обзор 10
1.1 Виды женьшеней 13
1.2 Химический состав женьшеня 14
1.3 Извлечение гинсенозидов из растительного сырья 17
1.4 Выделение биоактивных компонентов женьшеня 20
1.4.1 Препаративная хроматография 21
1.4.2 Имунноаффинная хроматография 22
1.5 Определение целевых аналитов 23
1.5.1 Определение гинсенозидов методом ТСХ 23
1.5.2 Определение компонентов женьшеня методом ГХ 24
1.5.2 Определение состава женьшеня методом мицеллярной электрокинетической хроматографии 25
1.5.3 Определение состава женьшеня методом ВЭЖХ в сочетании с различными способами детектирования 26
1.5.4 Определение состава женьшеня методом ИФА 32
1.5.5 Определение состава женьшеня методом многомерной хроматографии 33
1.6 Групповая идентификация и определение метаболических профилей 34
1.7 Альтернативные способы определения состава женьшеня 43
1.8 Исследования метаболизма гинсенозидов 45
1.9 Актуальные задачи исследования женьшеня 50
1.9.1 Идентификации видов женьшеня 50
1.9.2 Оценка качества женьшеневой продукции 52
1.9.3 Получение информации о структуре метаболитов гинсенозидов в режиме on-line 54
1.9.4 Изучение динамики химической трансформации женьшеневых сапонинов 55
1.9.5 Фармакокинетические исследования женьшеневых сапонинов 58
Глава 2. Оборудование, материалы, техника эксперимента 63
2.1 Оборудование и материалы 63
2.2 Техника эксперимента 65
2.2.1 Схема эксперимента по оптимизации ВЭЖХ-МС дететктирования гинсенозидов. 65
2.2.2 Схема эксперимента по разработке способа ультразвуковой экстракции гинсенозидов из растительного материала и продуктов на основе женьшеня . 67
2.2.3 Схема эксперимента по по получению гинсенозидных профилей растительного материала и продуктов на основе женьшеня. 67
2.2.4 Схема эксперимента по препаративному ВЭЖХ выделению фракции неизвестного сапонина из чая на основе женьшеня. 68
Глава 3. Разработка способов обнаружения и определения гинсенозидов 70
3.1 Разработка способов определения гинсенозидов методом ВЭЖХ-МС/МС 70
3.1.1 Разработка способов детектирования гинсенозидов в режиме регистрации выбранных ионных переходов 70
3.1.2 Разработка способов определения псевдогинсенозидов в режиме регистрации выбранных ионных переходов 79
3.1.3 Выбор условий ВЭЖХ-МС детектирования гинсенозидов в режиме сканирования с использованием ЛИЛ 85
3.2 Разработка способов количественной оценки содержаний гинсенозидов 91
3.3 Разработка способов ультразвуковой экстракции гинсенозидов из растительного сырья и продуктов на основе женьшеня для ВЭЖХ-МС/МС анализа 94
3.3.1 Проверка применимости экстракции гинсенозидов способом «введено – найдено» 94
3.3.2 Сравнение хроматографических параметров разделения при использовании различных органических растворителей 96
3.3.3 Изучение эффективности извлечения гинсенозидов 97
Глава 4. Интерпретация масс-спектров гинсенозидов. Разработка способа групповой идентификации 102
4.1 Основные принципы интерпретации масс-спектров на примере стандартных гинсенозидов 102
4.1.1 Отличительные черты масс-спектров гинсенозидов 102
4.1.2 Примеры гинсенозидов, имеющих неотличимые масс-спектры 111
4.2 Алгоритм получения структурной информации из данных МС анализа образцов, содержащих женьшеневые сапонины 113
Глава 5 Апробация разработанного подхода обнаружения и определения гинсенозидов 124
5.1 Анализ объектов с использованием разработанного способа ВЭЖХ-МС/МС детектирования
в режиме сканирования с использованием ЛИЛ 124
5.1.1 Анализ корней женьшеня 124
5.1.2 Анализ коммерческих продуктов на основе женьшеня 130
5.1.3 Классификация обнаруженных гинсенозидов по типу сапогенина 134
5.3 Определение псевдогинсенозидов в режиме регистрации выбранных ионных переходов 137
5.4 Исследование состава женьшеневого улуна 140
5.4.1 МС анализ женьшеневого улуна 140
5.4.2 Разработка способа полупрепаративного ВЭЖХ выделения компонентов женьшеневого чая 144
5.4.3 ЯМР анализ фракций, содержащих биоактивные компоненты женьшеневого улуна 150
Литературный обзор 155
