Введение
1. Обзор литературы. Внеклеточные нуклеиновые кислоты: функции в биологических системах и применение в исследовательской и медицинской практике 7
1.1. Введение 7
1.2. Экзогенные нуклеиновые кислоты и их судьба в клетках млекопитающих 7
1.3. Нуклеиновые кислоты внеклеточных жидкостей 12
1.3.1. Нуклеи новые кислоты сред культур клеток 12
1.3.2. Нуклеиновые кислоты плазмы крови 14
1.3.3. Нуклеиновые кислоты других физиологических жидкостей 16
1.4. Биологические эффекты и функции внеклеточных нуклеиновых кислот 19
1.4.1. Внеклеточные нуклеиновые кислоты как возможные переносчики информации между клетками и органами иммунной системы. - 20
1.4.2. "Неспецифические" эффекты нуклеиновых кислот 22
1.4.3. Горизонтальный перенос генов 27
1.4.4. Биологические эффекты, детерминированные структурой и последовательностью внеклеточных нуклеиновых кислот 28
1.5. Нуклеиновые кислоты как противоопухолевые вакцины 32
1.5.1. Дендритные клетки, заполненные РНК 34
1.5.2. РНК-вакцины, основанные на заключении РНК в липосомы (липосомные РНК-вакцины) 35
1.5.3. «Голые» РНК-вакцины 36
1.5.4. Самореплицирующиеся вакцины 37
1.5.5. Иммунология РНК вакцин: механизмы и иммуномодуляторы 38
1.6. Генная терапия 40
1.6.1. Основные средства доставки генов в организм 40
1.6.2. Направленная доставка генов 43
1.6.3. Экспрессия трансфицированных генов 44
1.6.4.0 типах клеток-мишеней. Стволовые клетки 44
1.6.5. Генная терапия рака 46
2. Материалы и методы
3. Результаты и их обсуждение 59
3.1. Нуклеиновые кислоты плазмы молока человека 60
3.2. Олигонуклеотиды сыворотки крови 62
3.3. Олигонуклеотиды спинномозговой жидкости 65
3.4. Определение состава нуклеиновых кислот человеческого молока 72
3.5. Количественная оценка содержания РНК в человеческом молоке 78
3.6. Анализ РНК человеческого молока двумерным электрофорезом в ПААГ 80
3.7. Выделение индивидуальных олигорибонуклеотидов человеческого молока и установление их первичной структуры 80
3.7.1. Первичная структура олигорибонуклеотидов 1-3 84
3.7.2. Первичная структура олигорибонуклеотида 4 86
3.7.3. Первичная структура олигорибонуклеотида 5 89
3.8. Механизмы происхождения внеклеточных нуклеиновьк кислот в молоке человека 92
3.9. Биологические эффекты внеклеточных нуклеиновых кислот 94
3.9.1. Влияние внеклеточных РНК человеческого молока на фосфорилирование молочных белков 95
3.9.2.Влияние внеклеточных РНК молока на жизнеспособность клеток аденокарциноми молочной железы человека MCF-7 97
4. Выводы 104
5. Список литературы 105
