Введение
Глава 1. Обзор литературы 14
1.1 Роль воспаления в развитии пролиферативной витреоретинопатии.. 14
1.1.1 Факторы риска развития пролиферативной витреоретинопатии 14
1.1.2 Патофизиология заболевания 17
1.1.3 Факторы роста и цитокины в развитии пролиферативной витреоретинопатии 18
1.1.4 Клетки, участвующие в формировании мембран при ПВР
1.1.4.1 Клетки пигментного эпителия сетчатки 22
1.1.4.2 Макрофаги 24
1.1.4.3 Мюллеровы клетки 26
1.1.4.4 Фибробласты 27
1.2 Роль метаболитов арахидоновой кислоты в физиологии глаза 28
1.2.1 Метаболизм арахидоновой кислоты 28
1.2.2 Физиологическая роль циклооксигеназ в организме 29
1.2.3 Физиологическая роль циклооксигеназ в глазу 32
1.2.4 Физиологическая роль простагландинов в глазу 33
1.2.5 Роль метаболитов арахидоновой кислоты в разрешении воспалительного процесса в глазу 35
1.3 Роль факторов роста в физиологии глаза з
1.3.1 Эндотелиальный фактор роста (VEGF) 37
1.3.2 Нейротрофины. Нейротрофический фактор роста. Фактор роста нервов
1.4 Моделирование пролиферативной витреоретинопатии in vivo 47
1.5 Лечение пролиферативной витреоретинопатии
1.5.1 Триамцинолона ацетонид 54
1.5.2 Лорноксикам 57
Глава 2. Материалы и методы исследования 59
2.1 Клинические материалы и методы исследования пациентов 59
2.1.1 Клинико-функциональное состояние пациентов 59
2.1.2. Методы обследования пациентов 62
2.1.3 Методика хирургического удаления мембран 63
2.1.3.1 Предоперационная подготовка пациентов 64
2.1.3.2 Техника проведения хирургического вмешательства 64
2.2 Экспериментальные материалы и методы исследования 66
2.2.1 Анализ экспрессии генов циклооксигеназ и факторов роста методом обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции 66
2.2.1.1 Выделение РНК 66
2.2.1.2 Проведение ДНК-азной обработки РНК 67
2.2.1.3 Проведение обратной транскрипции (ОТ) мРНК 68
2.2.1.2.3 Проведение полимеразной цепной реакции (ПЦР) 68
2.2.2 Содержание животных 70
2.2.3 Обследование глаз крысы 70
2.2.4 Разработка диспазной модели пролиферативной витреоретинопатии у крыс (Эксперимент №1) 71
2.2.4.1 Распределение животных по группам 71
2.2.5 Исследование действий противовоспалительных препаратов на динамику развития ПВР у крыс (Эксперимент №2) 72
2.2.5.1 Схема введения лорноксикама и триамцинолона ацетонида. 72
2.2.5.2 Распределение животных по группам 72
2.2.6 Получение гистологических препаратов крысиных глаз 73
2.2.6.1 Окрашивание гематоксилин-эозином 73
2.2.6.2 Окрашивание азаном по методу Гейденгайна на коллагены. 74
2.2.7 Метод обсчета гистологических препаратов крысиных глаз 74
2.2.8 Исследование экспрессии циклооксигеназ в сетчатке и хориоидее в диспазной модели ПВР у крыс, и влияния противовоспалительных препаратов на этот процесс (Эксперимент №3) 2.2.8.1 Распределение животных по группам 75
2.2.8.2 Иммуногистохимическое окрашивание на ЦОГ-1 и ЦОГ-2 75
2.2.9 Метод обсчета препаратов крысиных глаз, окрашенных иммуногистохимически 76
2.3 Статистический анализ 77
Глава 3. Результаты анализа экспрессии ростовых, трофических и провоспалительных факторов в эпиретинальных мембранах 78
Глава 4. Результаты разработки диспазной модели пролиферативной витреоретинопатии у крыс и критериев оценки состояния сетчатки и хориоидеи 83
4.1 Критерии оценки состояния сетчатки и хориоидеи при развитии ПВР у крыс 83
4.2 Результаты внешнего осмотра крысиных глаз 87
4.3 Результаты оценки изменений сетчатки после интравитреальной инъекции диспазы и образования эпиретинальных мембран 88
Глава 5. Результаты действия противовоспалительных препаратов на динамику развития пролиферативной витреоретинопатии у крыс 94
5.1 Общее состояние животных 94
5.2 Результаты клинических данных, полученных при осмотре глаз животных 95
5.3 Результаты анализа изменений архитектоники сетчатки 97
5.4 Результаты анализа изменений толщины слоев сетчатки и хориоидеи на разных сроках развития ПВР 103
Глава 6. Результаты действия противовоспалительных препаратов на экспрессию циклооксигеназ в диспазной модели пролиферативной витреоретинопатии у крыс 112
6.1 Изменения экспрессии ЦОГ-1 и ЦОГ-2 в хориоидее и слоях сетчатки на ранних сроках развития ПВР 112
6.2 Изменения экспрессии ЦОГ-1 и ЦОГ-2 в хориоидее и слоях сетчатки на поздних сроках развития ПВР 118
6.3 Экспрессия ЦОГ-1 и ЦОГ-2 в мембранах, образующихся в диспазной модели пролиферативной витреоретинопатии у крыс 120
Заключение 122
Выводы 143
Практические рекомендации 145
Список сокращений 146
Список литературы
