Введение
Глава 1 Обзор литературы 12
1.1 Состав смеси флавоноидов горянки 12
1.2 Методы извлечения флавоноидов из горянки 14
1.3 Выделение отдельных биоактивных компонентов горянки 16
1.4 Методы определения целевых аналитов
1.4.1 Тонкослойная хроматография 19
1.4.2 Капиллярный электрофорез 20
1.4.3 Газовая хроматография 25
1.4.4 Высокоэффективная жидкостная хроматография
1.5 Определение флавоноидов горянки в биопробах 32
1.6 Исследования метаболизма флавоноидов горянки 34
Глава 2 Материалы и методы исследования 44
2.1 Реактивы и материалы 44
2.2 Стандартные образцы 45
2.3 Исследуемые образцы 45
2.4 Оборудование, вспомогательные устройства, средства измерений и программное обеспечение 46
2.6 Приготовление рабочих и буферных растворов 48
2.6.1 Подготовка посуды 48
2.6.2 Подготовка деионизованной воды 49
2.6.3 Приготовление фосфатного буферного раствора 49
2.6.4 Приготовление карбонатного буферного раствора 49
2.6.5 Приготовление растворов стандартных образцов 49
2.6.6 Приготовление градуировочных растворов икариина, икаритина, икаризида I, икаризида II, эпимедина А и эпимедина В в метиловом спирте 50
2.6.7 Приготовление подвижной фазы для высокоэффективной жидкостной хроматографии 50 2.7 Техника эксперимента 51
2.7.1 Схема эксперимента по исследованию процессов масс-фрагментации и оптимизации энергии соударений 51
2.7.2 Схема эксперимента по определению флавоноидов горянки в растительных материалах и продуктах на их основе 53
2.7.3 Схема эксперимента по разработке способа извлечения основных компонентов горянки из растительных материалов сверхкритическим диоксидом углерода 55
2.7.4 Схема эксперимента по разработке способа определения действующих соединений горянки в биологических пробах 56
2.7.5 Схема эксперимента по разработке способа обнаружения флавоноидов горянки в растительном сырье и продуктах на его основе 57
2.7.6 Получение биоматериала 58
Глава 3. Результаты и обсуждение 60
3.1 Разработка способа определения флавоноидов горянки методом ВЭЖХ-МС/МС 60
3.1.1 Разработка способа идентификации икариина 60
3.1.2 Разработка способа количественного определения флавоноидов горянки в режиме регистрации выбранных ионных переходов
3.2 Разработка способа группового обнаружения флавоноидов горянки 77
3.3 Разработка способа экстракции флавоноидов из горянки 86
3.4 Разработка способа определения флавоноидов горянки в моче 89
3.5 Обнаружение метаболитов флавоноидов горянки в моче крыс 100
Выводы 106
Список использованных источников 108
