Введение
ГЛАВА I Обзор литературы 12
1.1 Ведение культуры соматических клеток и регенерация мягкой пшеницы in vitro
1.1.1 Зависимость частоты индукции каллуса и регенерации растений пшеницы от типа экспланта
1.1.2 Зависимость частоты индукции каллуса и регенерации растений пшеницы от генотипа
1.1.3 Влияние состава среды на частоту индукции каллусогенеза и регенерации растений пшеницы
1.2 Прямой перенос генов в злаки - биобаллистическая генетическая трансформация мягкой пшеницы
1.2.1 Параметры баллистической трансформации мягкой пшеницы
1.2.2 Маркерные гены 23
1.2.3 Селективные гены и системы селекции. 25
1.2.4 Селективный ген bar. Механизм действия 26
1.2.5 Негативная селекция трансгенной ткани пшеницы in vitro
1.3 Генетика устойчивости растений к абиотическим стрессам
1.3.1 Механизм действия гена глутатион S-трансфераза (GST). Разнообразие генов GST
ГЛАВА II Материалы и методы 38
2.1 Растительный материал. Получение морфогенетической каллусной культуры соматических клеток и регенерация in vitro растений мягкой пшеницы 38
2.2 Выделение плазмидной ДНК, работа с бактерией е. coli 41
2.3 Протокол баллистической трансформация мягкой пшеницы
2.4 Создание векторной конструкции pGSTBAR 46
ГЛАВА III Оптимизация ведения культуры соматических клеток мягкой пшеницы in vitro
3.1 Влияние генотипа на частоту индукции морфогенетического каллуса мягкой пшеницы
3.2 Влияние обработки зерновок низкой температурой на частоту индукции морфогенетического каллуса
3.3 Изучение влияния различных типов фитогормонов и их концентрации в среде на частоту регенерации растений 59 мягкой пшеницы in vitro
ГЛАВА IV Получение и анализ трансгенных растений мягкой пшеницы несущих гены bar и gst
4.1 Влияние биобаллистического воздействия на морфогенетический потенциал тканей мягкой пшеницы
4.2 Оптимизация параметров баллистической трансформации мягкой пшеницы
4.3 Мониторинг процесса трансформации путем исследования транзиентной и стабильной экспрессии гена gfp
4.4. Сравнительная оценка методов селекции трансгенных тканей пшеницы
4.5 Анализ наследования гена bar у трансгенных линий пшеницы ТІ
4.6 Определение устойчивости трансгенных растений ТІ поколения к хлоридно-натриевому засолению
Заключение 115
Выводы 117
Список литературы 118
