Введение
1. Обзор литературы 15
1.1. Бактерии рода Azospirillum: современные представления о систематике, физиологии и экологии 15
1.1.1. Систематика рода Azospirillum и наиболее изученные представители : 15
1.1.2. Азоспириллы - природные симбионты высших растений 17
1.1.3. Строение клеточной поверхности Л. brasilense 23
1.1.4. Агглютинин зародышей пшеницы и его влияние на метаболизм азоспирилл 26
1.2. Стресс у бактерий 38
1.2.1. Стрессовые факторы и стрессовые ответы бактерий . 38
1.2.2. Реакция азоспирилл на некоторые виды стресса 39
1.3. Регуляция роста у бактерий 43
1.3.1. Важность биокоммуникативных процессов в развитии бактериальных популяций 43
1.3.2. Регуляция роста бактерий молекулярными сигналами полипептидной природы 46
1.3.3. Регуляция роста бактерий низкомолекулярными метаболитами 50
1.4. Инфракрасная спектроскопия как исследовательский инструмент в современной микробиологии 54
2. Материалы и методы исследования 62
2.1. Выращивание бактериальных культур 62
2.2. Оценка ростовых параметров культуры 63
2.2.1. Оценка общего числа клеток в культуре 63
2.2.2. Определение числа жизнеспособных клеток 64
2.2.3. Оценка биомассы после завершения культивирования 64
2.2.4. Кривые роста культур Л. brasilense 64
2.3. Постановка экспериментов по длительному культивированию A. brasilense 64
2.4. Двойная радиальная иммунодиффузия 65
2.5. Приготовление образцов клеток для ИК-спектроскопии . 65
2.6. ИК-фурье-спектроскопия в режиме диффузного отражения . 66
2.7. Статистическая обработка полученных результатов 67
3. Результаты исследований и их обсуждение 68
3.1. Влияние агглютинина зародышей пшеницы (АЗП) на рост A. brasilense 68
3.1.1. АЗП как возможный фактор роста для A. brasilense на полужидкой среде 68
3.1.2. АЗП как возможный фактор роста для A. brasilense на жидкой среде 75
3.2. Исследование клеточных ответов Л. brasilense на стресс и влияние лектина пшеницы с использованием ИК-фурье спектроскопии 81
3.2.1. Изменения в составе клеток A. brasilense Sp245 в ответ на комплексный стресс 81
3.2.2. Изменения в составе клеток A. brasilense Sp245, выращенных в аэробных условиях в присутствии АЗП 88
3.3. Адаптация A. brasilense к стрессам при длительном культивировании 92
3.3.1. Торможение роста A. brasilense Sp245 при различных видах стресса 92
3.3.2. Влияние стрессовых температурных условий и питательных сред (трофический фактор) на состояние культуры при длительном культивировании 98
3.4. Исследование накопления внутриклеточного полигидроксобутирата (ПГБ) A. brasilense в различных стрессовых условиях при длительном культивировании методом ИК-фурье-спектроскопии 104
3.4.1. Динамика накопления ПГБ клетками на различных стадиях развития культуры в различных стрессовых условиях 104
3.4.2. Сравнительный анализ внутриклеточного ПГБ на различных стадиях развития культуры 113
Заключение 124
Выводы 126
Список публикаций автора по теме диссертации 127
Благодарности 131
Список литературы 132
