Введение
ГЛАВА I. Обзор литературы 9
1.1. Свойства и функции мезенхимальных стволовых клеток костного мозга 9
1.2. Миграционная активность МСК 10
1.3. Методы противоопухолевой терапии с применением МСК 12
1.3.1. Таргетная доставка цитокинов с помощью МСК 14
1.3.2. Доставка пролекарств с помощью МСК 15
1.3.3. Применение МСК для доставки онколитических вирусов... 15
1.3.4. МСК - доставщики антиангиогенных веществ 16
1.3.5. Адресная доставка проапоптотических белков с помощью МСК 17
1.3.6. Применение немодифицированных МСК для терапии рака... 17
1.4. Распределение МСК после трансплантации 18
1.4.1. Способы визуализации МСК в организме реципиента после трансплантации 20
1.5. Современное представление о влиянии МСК на опухолевый рост... 23
1.5.1. Принципы регуляции опухолевого процесса
мезенхимальными стволовыми клетками 26
Заключение 31
ГЛАВА II. Материалы и методы исследования 33
2.1. Выделение МСК из костного мозга мышей 33
2.2. Культивирование МСК костного мозга 33
2.3. Культивирование клеток B16-F10 34
2.4. Индукция адипогенной дифференцировки МСК 35
2.5. Индукция остеогенной дифференцировки МСК 35
2.6. Иммунофенотипирование МСК 36
2.7. Исследование миграционной активности МСК к опухолевым клеткам с помощью двухкамерной культуральной системы 36
2.8. Оценка жизнеспособности опухолевых клеток с помощью МТТ теста 36
2.9. Прижизненная окраска МСК красителем Хехст 33342 37
2.10. Схема эксперимента изучения распределения МСК в организме здоровых мышей и мышей-опухоленосителей 37
2.11. Анализ выживаемости животных и изменения объема опухолей 38
2.12. Выделение ДНК 38
2.13. Количественная полимеразная цепная реакция в режиме реального времени 39
2.14. Приготовление срезов на замораживающем микротоме 40
2.15. Статистическая обработка полученных результатов 41
ГЛАВА III. Результаты исследований 42
3.1. Получение и морфофункциональная характеристика штамма мезенхимальных стволовых клеток костного мозга мышей линии C57BL/6 42
3.2. Изучение миграционной активности МСК в условиях опухолевого роста и влияния МСК на пролиферацию клеток линии B16-F10 в системе in vitro 47
3.3. Влияние внутривенной трансплантации МСК на выживаемость животных-опухоленосителей и кинетику роста меланомы B16-F10 50
3.4. Количественное распределение трансплантированных МСК 51
3.4.1. Распределение МСК в организме здоровых животных и животных - носителей меланомы B16-F10 через 1 час после трансплантации
3.4.2. Распределение МСК в организме здоровых животных и животных - носителей меланомы B16-F10 через 3 суток после
трансплантации 56
3.4.3. Распределение МСК в организме здоровых животных и животных - носителей меланомы B16-F10 через 7 суток после трансплантации
3.4.4. Распределение МСК в организме здоровых животных и животных - носителей меланомы B16-F10 через 14 суток после трансплантации 58
3.4.5. Кинетика накопления МСК в различных органах здоровых
животных и животных-носителей опухоли в течение 14 суток 60
3.5. Исследование распределения МСК в организме животных -носителей меланомы B16-F10 при помощи флуоресцентной микроскопии "
ГЛАВА IV. Обсуждение результатов исследования... 70
Заключение 83
Выводы 86
Спиок сокращений 88
Список используемой литературы
