Введение
Глава 1. Обзор литературы 8
1.1. Транспорт незаряженных молекул через биологические мембраны и модельные мембранные системы 8
1. 1. 1. Транспорт неэлектролитов через липидный бислой биологических мембран 9
1. 1.2. Облегченная диффузия 14
1. 1. 3. Диффузия через белковые поры 15
1. 1.4. Структура белков семейства аквапоринов 17
1. 1. 5. Роль аквапоринов в транспорте газов (СО2, NH3 и NO) через биологические мембраны и модельные мембранные системы 23
1. 1.6. Роль белка полосы 3 и комплекса белков резус-фактора в транспорте газов (СОг и NH3) через биологические мембраны 27
1. 2. Проницаемость биологических и модельных мембран для кислорода 31
1.2. 1. Метод флуоресцентных зондов 31
1.2.2. Метод спиновых зондов 33
1.2.3. Метод монослоев 35
1. 2. 4. Роль мембранных белков в трансмембранном транспорте кислорода 37
1.3. Основные характеристики процесса связывания кислорода эритроцитами по данным струевых методов 39
1. 3. 1. Поглощение кислорода эритроцитами 39
1. 3. 2. Дезоксигенация гемоглобина эритроцитов в присутствии дитионита натрия 45
Цели и задачи исследования 47
Глава 2. Материалы и методы 48
2. 1. Измерение коэффициента проницаемости для кислорода монослойных мембран из суммарных липидов эритроцитов 48
2. 1. 1. Выделение суммарных липидов из эритроцитов 48
2. 1. 2. Измерение коэффициента проницаемости для кислорода 48
2. 2. Кинетические эксперименты 50
2.2. 1. Описание экспериментальной установки 50
2. 2. 2. Определение скорости поглощения роданит-иона эритроцитами 53
2. 2. 3. Определение скорости поглощения 02 и СО эритроцитами 54
2. 2. 4. Определение коэффициента осмотической водной проницаемости мембраны эритроцитов 55
2. 2. 5. Регистрация кинетических кривых взаимодействия гемоглобина и 02 в гомогенном растворе 57
2. 3. Регистрация кривых диссоциации оксигемоглобина эритроцитов 57
2.4. Определение микровязкости липидного бислоя мембраны эритроцитов 59
Глава 3. Результаты и обсуждение 61
3.1. Проницаемость липидного компонента мембран эритроцитов для кислорода 61
3. 2. Влияние ингибиторов мембранного транспорта на скорость поглощения кислорода эритроцитами 70
3.2. 1.ДИДС 71
3.2.2.ЩС12игсХМБ 76
3.3. Влияние HgCl2 и пХМБ на кинетику реакции гемоглобина и кислорода в гомогенном растворе 86
3. 4. Влияние HgCl2 на кривую диссоциации оксигемоглобина 92
3. 5. Влияние HgCl2 на микровязкость липидного бислоя мембраны эрит роцитов 97
3. 6. Структурные основы и физиологическая значимость транспорта 02
через мембрану эритроцитов с участием мембранных белков 100
Заключение 107
Выводы 109
Список литературы
