Введение
Глава 1 Свойства мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток и их использование в лечении острой печеночной недостаточности (обзор литературы) Биологические свойства мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток (ММСК) 14
Иммунорегуляторные свойства ММСК 16
Плацента как источник ММСК 20
Особенности регенерации печени 21
Регенерация печени при повреждении 21
Роль Купферовских клеток в регенерации печени 23
Изменения регенерации печени при старении 25
Альтернативные пути решения проблемы дефицита донорских органов 29
Экспериментальные модели острой печеночной недостаточности 29
Хирургические модели на животных 29
Химические модели на животных 31
Заключение 36
Глава 2 Материалы и методы исследования 37
2.1. Общая характеристика лабораторных животных 37
2.2. Экспериментальное планирование беременности 38
2.3. Выделение, культивирование и субкультивирование ММСК 39
2.4. Идентификация ММСК 40
2.4.1. Дифференцировка в остеогенном направлении 40
2.4.2. Дифференцировка в адипоцитарном направлении 43
2.4.3. Идентификация ММСК иммуноцитохимическим методом 45
2.4.4. Иммунофенотипирование ММСК 47
2.5. Подсчет и определение жизнеспособности клеток 49
2.6. Оценка хоуминга ММСК 50
2.7. Моделирование субтотальной резекции печени у животных 51
2.8. Моделирование токсического гепатита у животных 52
2.9. Методы оценки состояния регенераторных процессов в печени 54
2.9.1. Биохимический анализ крови 54
2.9.2. Определение концентрации фибриногена в плазме крови 54
2.9.3. Морфометрические показатели 55
2.9.4. Определение выраженности апоптоза 55
2.9.5. Микроядерный тест на гепатоцитах мышей. 58
2.10. Статистическая обработка полученных результатов. 59
Глава 3 Влияние трансплантации ММСК на морфофункциональное состояние неповрежденной и поврежденной печени мышей 61
Часть I. Оценка хоуминга мультипотентных мезенх имальных стромальных клеток в физиологических условиях и после субтотальной резекции 61
Часть II. Биохимические и морфометрические показатели зрелых и старых мышей после трансплантации ММСК в физиологических условиях 64
2.1. Биохимические показатели периферической крови зрелых и старых мышей после трансплантации ММСК в физиологических условиях 64
2.2. Морфометрические показатели печени зрелых и старых мышей после трансплантации ММСК в физиологических условиях 68
Часть III. Биохимические и морфометрические показатели после трансплантации ММСК зрелых и старых мышей с субтотальной резекцией печени 72
3.1. Биохимические показатели периферической крови после трансплантации ММСК зрелых и старых мышей с субтотальной резекцией печени 73
3.2. Морфометрические показатели печени после трансплантации ММСК у зрелых и старых мышей с субтотальной резекцией печени 87
Часть IV. Биохимические и морфометрические показатели после трансплантации ММСК у зрелых и старых мышей с токсическим гепатитом 101
4.1. Биохимические показатели периферической крови после трансплантации ММСК у зрелых и старых мышей с токсическим гепатитом 102
4.2. Морфометрические показатели печени после трансплантации ММСК зрелых и старых мышей с токсическим гепатитом 115
Часть V. Сравнительная характеристика биохимических и морфометрических показателей после трансплантации ММСК зрелых и старых мышей в физиологических условиях, в условиях субтотальной резекции печени и токсического гепатита 131
Часть VI. Показатели микроядерного теста после трансплантации ММСК у зрелых и старых мышей в физиологических условиях, в условиях повреждения печени 142
6.1. Показатели микроядерного теста после трансплантации ММСК у зрелых и старых мышей в физиологических условиях 142
6.2. Показатели микроядерного теста после трансплантации ММСК у зрелых и старых мышей с субтотальной резекцией печени 143
6.3. Показатели микроядерного теста после трансплантации ММСК у зрелых и старых мышей с токсическим гепатитом 145
Общее заключение 148
Выводы 161
Практические рекомендации 162
Список сокращений 163
Список литературы 165
