Введение
1 Литературный обзор 12
1.1 Классификация полифенольных соединений 12
1.1.1 Флавоноиды 13
1.1.2 Изофлавоноиды 14
1.1.3 Номенклатура флавоноидов и изофлавоноидов 16
1.2 Распространение полифенольных соединений в видах рода Iris 16
1.2.1 Изофлавоноиды 17
1.2.2 Флавоноиды 25
1.2.3 Бензолкарбоновые кислоты, кетоны, фенилпропаноиды, стильбены, ксантоны 31
1.3 Методы выделения и исследования флавоноидов и изофлавоноидов 37
1.3.1 Экстракция и препаративная хроматография 37
1.3.2 Методы анализа и идентификации полифенольных соединений 38
1.4 Биологическая активность флавоноидов и изофлавоноидов из видов рода Iris 39
1.4.1 Антиоксидантная активность 39
1.4.2 Способность полифенолов предотвращать развитие нейродегенеративных заболеваний 40
1.4.3 Противоопухолевая активность 41
1.4.4 Антимутагенная активность 42
1.4.5 Противовоспалительная активность 42
1.4.6 Антимикробная активность 43
1.4.7 Эстрогенная активность 43
1.4.8 Перспективы использования полифенольных соединений для лечения диабета 43
1.5 Биосинтез изофлавоноидов 44
2 Результаты и обсуждение 46
2.1 Экстракция полифенольных соединений из корней и стеблей
Iris pseudacorus 47
2.2 Состав полифенольных метаболитов стеблей I. pseudacorus 48
2.2.1 Установление структуры транс-3-гидрокси-5,7-диметоксифлаванона 56
2.3 Состав полифенольных метаболитов корней I. pseudacorus 58
2.3.1 Установление структуры 7-О--D-глюкопиранозида 5,7-дигидрокси-6,2 диметоксиизофлавона 61
2.4 Состав полифенольных метаболитов клеточной культуры I. pseudacorus 64
2.4.1 Структурная идентификация 4 -О--D-глюкопиранозида дегидродикониферилового спирта 67
2.5 Определение содержания полифенольных соединений в корнях, стеблях и клеточных культурах I. pseudacorus 69
2.5.1 Содержание полифенольных соединений в корнях и стеблях растения 74
2.5.2 Влияние компонентов питательных сред на продукцию полифенольных соединений клеточной культурой 75
2.5.3 Содержание полифенольных соединений в "желтой" и "зеленой" линиях клеточной культуры 77
2.6 Биологическая активность полифенольных соединений I. pseudacorus 79
2.6.1 Противоопухолевая активность полифенольных соединений in vitro 79
2.6.2 Антирадикальная и антиоксидантная активности полифенольных соединений 80
2.7 Филогенетические отношения видов рода Iris на основании данных химического состава полифенольных метаболитов методом иерархической классификации 83
3 Экспериментальная часть 87
3.1 Приборы и материалы 87
3.2 Тонкослойная хроматография 87
3.3 Высокоэффективная жидкостная хроматография 87
3.4 Хроматомасс-спектрометрия 88
3.5 Растительное сырье 88
3.6 Клеточная культура растения I. pseudacorus 88
3.6.1 Влияние фенилаланина и ионов меди на продукцию полифенольных соединений клеточной культурой 89
3.7 Методы выделения полифенольных соединений из корней, стеблей и клеточной культуры I. pseudacorus 89
3.7.1 Экстракция полифенольных соединений 89
3.7.2 Препаративная хроматография 90
3.8 Метод количественного определения полифенольных соединений в корнях, стеблях и клеточных культурах I. pseudacorus 97
3.8.1 Внутренний стандарт для ВЭЖХ 97
3.8.2 Подготовка проб 97
3.8.3 Определение содержания полифенольных соединений методом ВЭЖХ 98
3.8.4 Валидация методики количественного определения полифенолов 99
3.9 Методы исследования противоопухолевой активности полифенольных соединений I. pseudacorus in vitro 99
3.9.1 Культивирование клеток 99
3.9.2 Определение цитотоксической активности полифенолов по отношению к клеткам карциномы кишечника человека HT-29 99
3.9.3 Метод мягких агаров 100
3.10 Методы определения антирадикальной и антиоксидантной активности полифенольных соединений I. pseudacorus 100
3.10.1 Определение антирадикальной активности полифенольных соединений 100
3.10.2 Определение антиоксидантной активности полифенолов на модели автоокисления линетола 100
3.11 Статистическая обработка данных 101
3.12 Построение иерархической классификации по матрице сходства для сравнения химических составов полифенолов видов рода Iris и их таксономии 101
Заключение 103
Выводы 106
Список литературы 108
