Введение
Глава 1. CLASS Роль P.aeruginosa в инфекционной патологии человек CLASS а 11
Глава 2. Основные факторы патогенности и антигенные структуры синегнойной палочки 20
Глава 3. Перспективы разработки генно-инженерных вакцин против бактериальных инфекций 31
Собственные исследования 43
Глава 4. Материалы и методы 43
4.1. Материалы 43
4.1.1. Использованные штаммы 43
4.1.2. Экспериментальные животные 43
4.1.3. Протеины и сыворотки 43
4.1.4. Оборудование 44
4.1.5. Реактивы 44
4.2. Методы 46
4.2.1. Выделение геномной ДНК P.aeruginosa 46
4.2.2. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) 46
4.2.3. Трансформация клеток E.coli 47
4.2.4. Выделение плазмидной ДНК (микровариант) 49
4.2.5. Определение нуклеотидной последовательности 50
4.2.6. Электрофорез белков в полиакриламидном геле по Лэммли...53
4.2.7. Иммуноблоттинг і 54
4.2.8. Иммуноферментный анализ (ИФА) 55
4.2.9. Получение иммунных сывороток 56
4.2.10. Статистические методы 57
Глава 5. Получение рекомбинантного белка наружной мембраны OprF P.aeruginosa 58
5.1. Клонирование гена рекомбинантного белка OprF 58
5.2. Получение рекомбинантного белка OprF 63
5.3. Характеристика специфичности полученного рекомбинантного белка OprF 66
Глава 6. Изучение иммунобиологических свойств рекомбинантного белка OprF 69
6.1. Изучение антигенных свойств рекомбинантного белка OprF 69
6.2. Изучение токсичности рекомбинантного белка OprF 73
6.3. Изучение протективных свойств рекомбинантного белка OprF..76
Глава 7. Изучение свойств иммунных кроличьих сывороток к рекомбинантному белку OprF P.aeruginosa 78
7.1. Исследование превентивных свойств иммунных кроличьих сывороток к рекомбинантному белку OprF 78
7.2. Изучение антибактериальных свойств иммунных сывороток к рекомбинантному белку OprF 80
7.3. Оценка внутривидовой специфичности полученных иммунных сывороток к рекомбинантному белку OprF 82
Заключение 84
Выводы 93
Список литературы 94
