Введение
Глава 1. Обзор литературы 13
1.1. Бронхиальная астма как глобальная проблема здравоохранения 13
1.2. Патогенез бронхиальной астмы 15
1.3. Роль цитокинов в патогенезе бронхиальной астмы 20
1.4. Антицитокиновая терапия бронхиальной астмы: доклинические и клинические исследования 24
1.5. Механизм РНК-интерференции 37
1.6. Способы доставки нуклеиновых кислот 40
1.7. Применение интерференции РНК для терапии бронхиальной астмы 59
Глава 2. Материалы и методы 64
2.1. Разработка молекул миРНК изучение х биологической активности в экспериментах in vitro 64
2.2. Проектирование оптимального носителя для молекул миРНК и изучение его биологической активности в экспериментах in vitro 68
2.3. Изучение биологической активности комплекса молекул миРНК и пептида LTP на модели аллергической БА у мышей 72
2.4. Изучение острой токсичности у мышей при внутривенном пути введения 78
2.5. Изучение хронической токсичности у мышей при ингаляционном пути введения 80
2.6. Изучение иммунотоксичности 85
2.7. Изучение аллергизирующих свойств в тесте высвобождения гистамина базофилами крови 87
2.8. Исследование аллергизирующих свойств siIL4-89-153/LTP при повторном ингаляционном введении мышам 89
2.9. Изучение аллергизирующих свойств siIL-89-153/LTP ри многократном внутрибрюшинном введении в тесте развития анафилактической реакции у мышей 91
2.10. Изучение мутагенного действия siIL4-89-153/LTP в тесте Эймса 94
2.11. Изучение мутагенного действия siIL-4-89-153/LTP методом учета хромосомных аберраций в клетках костного мозга млекопитающих 98
2.12. Исследование ДНК-повреждающего действия siIL4-89-153/LTP in vivo методом «ДНК-комет» 101
Глава 3. Результаты 104
3.1 Проектирование молекул миРНК против гена ИЛ-4 человека 104
3.2 Разработка модели ля изучения биологической активности молекул миРНК в экспериментах in vitro 108
3.3 Изучение биологической активности молекул миРНК экспериментах in vitro 113
3.4 Изучение аддитивного биологического эффекта молекул миРНК siIL4-89 и siIL4-153 116
3.5 Проектирование оптимального носителя для молекул миРНК и изучение его биологической активности в экспериментах in vitro 117
3.6 Изучение фармакокинетики комплекса молекул миРНК и носителя 121
3.7 Изучение биологической активности комплекса молекул миРНК и пептида LTP на модели аллергической бронхиальной астмы у мышей 144
3.8 Изучение общетоксических свойств siIL-89-153/LTP 155
3.9 Изучение специфических видов токсичности siIL4-89-153/LTP 174
Глава 4. Обсуждение 201
4.1. Экспериментальное обоснование выбора состава комплекса silL-89-153/LTP 201
4.2. Особенности фармакокинетических параметров комплекса siIL4-89-153/LTP 210
4.3. Биологическая активность комплекса молекул миРНК против гена il-4 и катионного пептида LTP 218
4.4. Показатели безопасности комплекса siIL-89-153/LTP 225
Выводы 229
Список литературы 231
