Введение
Глава 1 Роль редоксактивных соединений во взаимоотношениях между партнерами в сообществах микроорганизмов (обзор литературы) 16
1.1. Межвидовая коммуникация с использованием химических сигналов и жизнедеятельность бактерий 16
1.1.1. Химическая сигнализация в формировании и развитии ассоциации «хозяин-бактерия» между Rhizobiaceae и бобовыми 22
1.1.2. Химическая коммуникация между микроорганизмами, образующими биопленки в полости рта человека 27
1.1.3. Химическая коммуникация в межвидовых взаимоотношениях с участием Pseudomonas aeruginosa 32
1.1.4. Развитие межвидовой коммуникации в сообществах почвенных бактерий 36
1.1.5. Перспективы исследований, направленных на установлении роли химических соединений, продуцируемых микроорганизмами, в межвидовой коммуникации 46
1.2. Про- и антиоксиданты в коммуникации и адаптации микробных сообществ 48
1.2.1. Редоксактивные соединения в колониальном развитии S.cerevisiae 51
1.2.1.1. Межклеточная коммуникации, дифференциация колоний и защита от стресса S.cerevisiae 51
1.2.1.2. Участие про- и антиоксидантов в механизмах защиты от стресса в колониях S.cerevisiae 55
1.2.1.3. Активные формы кислорода и запрограммированная смерть клетки у S.cerevisiae 60
1.2.2. Редоксактивные соединения и биопленки Candida sp 62
1.2.2.1. Фарнезол и активные формы кислорода в межклеточной сигнализации в популяциях Candida sp 64
1.3. Редоксактивные соединения и бактериальные биопленки. 67
1.3.1. Активные формы кислорода в межклеточной сигнализации в биопленках бактерий 72
1.3.2. Бактериальные биопленки и адаптация к оксидативному стрессу 76
Глава 2. Материалы и методы исследования 80
2.1. Общие данные 80
2.2. Характеристика штаммов микроорганизмов 80
2.3. Методы выделения микроорганизмов 81
2.4. Методы идентификации выделенных штаммов микроорганизмов 81
2.5. Изучение биологических свойств бактерий
2.5.1. Метод определения продукции бактериями пероксида водорода 82
2.5.2. Метод определения продукции бактериями гидроксильных радикалов 83
2.5.3. Метод определения продукции бактериями супероксиданион радикала 84
2.5.4. Метод определения продукции бактериями ингибиторов каталазы 84
2.5.5. Метод определения каталазной активности бактерий 85
2.5.6. Метод определения железовосстанавливающей и железоокисляющей способности бактерий 86
2.5.7. Метод определения общей антиоксидантной активности бактерий и отдельных фракций их метаболитов 86
2.5.8. Метод определения способности бактерий снижать бактерицидный эффект гидроксильных радикалов 87
2.5.9. Метод оценки влияния факторов среды на способность микроорганизмов продуцировать про- и антиоксиданты..
2.5.10. Метод определения адгезивных свойств бактерий 87
2.5.11. Метод определения гидрофобных свойств бактерий 89
2.5.12. Метод определения способности бактерий образовывать биопленки 89
2.5.13. Метод определения способности бактерий сорбировать белки 90
2.5.14. Метод определения антилизоцимной активности бактерий 90
2.6. Метод определения активности лизоцима 92
2.7. Метод изучения потенцирующего действия метаболитов пероксидпродуцирующих микроорганизмов на бактерицидную активность факторов врожденного иммунитета 93
2.8. Метод изучения потенцирующего действия метаболитов коринебактерий на антагонистическую активность пероксидпродуцирующих лактобацилл 93
2.9. Методика изучения изменения биологических свойств бактерий под влиянием метаболитов пероксидпролуцирующих лактобацилл 94
2.10 Методы статистической обработки полученных результатов 94
Глава 3. Характеристика способности представителей нормальной микрофлоры нижних отделов женского репродуктивного тракта продуцировать редоксактивные соединения 97
3.1. Характеристика исследуемых микроорганизмов 98
3.2. Изучение спектра, распространенности и выраженности метаболитов с прооксидантным действием у микроорганизмов, выделенных из нижнего отдела женского репродуктивного тракта
3.2.1. Изучение способности микроорганизмов продуцировать пероксид водорода 100
3.2.2. Изучение способности микроорганизмов продуцировать супероксиданион и гидроксильные радикалы 106
3.2.3. Изучение способности микроорганизмов продуцировать ингибиторы бактериальной катал азы 108
3.2.4. Изучение влияния факторов среды на продукцию пероксида водорода лактобациллами 111
3.3. Изучение спектра, распространенности и выраженности метаболитов с антиоксидантным действием у микроорганизмов, выделенных из нижнего отдела женского репродуктивного тракта 114
3.3.1. Оценка распространенности защитного действия бактериальных метаболитов от бактерицидного эффекта гидроксильных радикалов 114
3.3.2. Изучение общей антиоксидантной активности (ОАА) внеклеточных метаболитов бактерий 116
3.3.3. Изучение механизмов, обеспечивающих снижение бактерицидного эффекта гидроксильных радикалов 118
3.3.4. Изучение механизмов, регулирующих выживание бактерий в условиях окислительного стресса и дефицита ионов железа 121
3.3.5. Изучение влияния факторов среды на продукцию антиоксидантов лактобациллами 128
3.4. Изучение связи уровня про- и антиоксидантов,
продуцируемых автохтонными микроорганизмами, с микроэкологическим состоянием вагинального биотопа.. 130
Глава 4. Изучение влияния микробных про- и антиоксидантов на чувствительность бактерий к факторам микробного антагонизма и врожденного иммунитета 140
4.1. Изучение влияния метаболитов пероксидпродуцирующих лактобацилл на бактерицидную активность факторов врожденного иммунитета 140
4.2. Изучение влияния метаболитов бактерий с прооксидантным и антиоксидантным эффектом на антагонистическую активность пероксидпродуцирующих лактобацилл 152
Глава 5. Характеристика влияния про- и антиоксидантов на свойства микроорганизмов, определяющих их адаптационный и колонизационный потенциал 162
5.1. Влияние прооксидантов на адгезивные характеристики микроорганизмов и их способность к биопленкообразованию 163
5.2. Влияние антиоксидантов на адгезивные характеристики микроорганизмов и их способность к биопленкообразованию 171
5.3. Влияние прооксидантов на антилизоцимную и каталазную активности 176
Глава 6. Характеристика потенциальных возможностей использования активных форм кислорода для снижения численности микроорганизмов 185
6.1. Сравнительная характеристика биоцидных эффектов гидроксильных радикалов и пероксида водорода 185
6.2. Перспективы применения пероксидпродуцирующих микроорганизмов для создания биоцидных способов и композиций, использующих в качестве действующего начала активные формы кислорода і g Заключение 204
Литература
