Введение
Глава 1. Обзор литературы 11
1.1. Клеточный состав эпителия тонкой кишки 11
1.2. Виды транспорта в эпителии 13
1.3. Плотные контакты, строение и состав 15
1.4. Клеточные культуры и линии, как модели для изучения эпителия 37
1.5. Микробиота желудочно-кишечного тракта и вещества, изменяющие проницаемость эпителия 41
Глава 2. Материалы и методы исследования 53
2.1. Общие подходы к организации экспериментов на животных 53
2.2. Поддержание и работа с культурой клеток линии IPEC-J2 55
2.3. Регистрация электрофизиологических характеристик ткани кишки и культуры клеток в камере Уссинга 56
2.4. Исследование парацеллюлярного транспорта с использованием флуоресцеина натрия 58
2.5. Электронная микроскопия 59
2.6. Определение содержания белков плотных контактов в мембранной фракции клеток стенки тощей кишки и клеток культуры IPEC-J2 методом Вестерн-блот 59
2.7. Фармакологические соединения 62
2.8. Статистическая обработка результатов 63
Глава 3. Электрофизиологическое исследование тощей кишки крысы и линии клеток IPEC-J2 при действии холерного токсина и липополисахарида 64
3.1. Трансэпителиальное сопротивление эпителия тощей кишки и клеток линии IPEC-J2 под действием холерного токсина и липополисахарида 64
3.2. Изучение проницаемости слизистой оболочки тощей кишки крысы и линии клеток IPEC-J2 при действии холерного токсина и липополисахарида для флуоресцеина натрия 71
Глава 4. Исследование стенки тощей кишки крысы при действии холерного токсина и липополисахарида методом электронной микроскопии 74
4.1. Ультратонкое строение контрольной ткани тощей кишки крыс 74
4.2. Ультраструктура энтероцитов тощей кишки крысы при действии холерного токсина 76
4.3. Ультраструктура энтероцитов тощей кишки крысы при действии липополисахарида 77
Глава 5. Изменение уровня клаудинов в эпителии тощей кишки и в линии клеток IPEC-J2 под действием холерного токсина и липополисахарида 82
5.1. Изменение уровня клаудинов в тощей кишке крысы при действии холерного токсина и липополисахарида 82
5.2. Изменение уровня клаудинов в линии клеток IPEC-J2 под действием холерного токсина и липополисахарида 82
Обсуждение 85
Выводы 90
Список литературы 91
