ВВЕДЕНИЕ .................................................................................................................. 5
ГЛАВА 1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ ............................................................................. 15
1.1 Этиология и диагностика сахарного диабета 2 типа ......................................... 15
1.2 Патогенез сахарного диабета 2 типа ................................................................... 17
1.2.1 Инсулинорезистентность ................................................................................. 17
1.2.2 Дисфункция β-клеток поджелудочной железы................................................ 22
1.3 Осложнения сахарного диабета 2 типа ............................................................... 23
1.3.1 Макрососудистые осложнения ......................................................................... 24
1.3.2 Микрососудистые осложнения ........................................................................ 26
1.3.3 Неклассифицируемые осложнения ................................................................. 27
1.4 Лечение сахарного диабета 2 типа ...................................................................... 30
1.4.1 Препараты сульфонилмочевины и глиниды.................................................... 32
1.4.2 Инкретиномиметики ......................................................................................... 33
1.4.3 Бигуаниды.......................................................................................................... 35
1.4.4 Тиазолидиндионы.............................................................................................. 38
1.4.5 Ингибиторы α-глюкозидазы ............................................................................ 39
1.4.6 Ингибиторы натрий-глюкозного котранспортера-2 ...................................... 40
1.5 Новые молекулярные мишени для лечения сахарного диабета 2 типа ............ 41
ГЛАВА 2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ..................................................................... 46
2.1 Экспериментальные животные............................................................................ 46
2.2 Исследуемые соединения .................................................................................... 46
2.3 Фармакологические модели и тесты................................................................... 49
2.3.1 Оральный глюкозотолерантный тест ............................................................... 49
2.3.2 Скрининг гипогликемической активности ...................................................... 50
2.3.3 Генетически обусловленная модель сахарного диабета 2 типа ...................... 50
2.3.4 Диет-индуцированная модель сахарного диабета 2 типа................................ 51
2.3.5 Тетрахлорметан – индуцированная модель гепатотоксичности..................... 52
2.3.6 Биохимическое исследование крови ................................................................ 53
3
2.3.7 Гистологическое исследование печени............................................................ 53
2.3.8 Морфометрическое исследование печени ....................................................... 54
2.3.9 Определение концентрации инсулина в крови мышей методом ИФА .......... 54
2.3.10 Определение концентрации GIP в крови мышей методом ИФА.................. 55
2.4 Исследования in vitro ........................................................................................... 56
2.4.1 Определение активности соединений по отношению к FFAR1 ..................... 56
2.4.2 Изучение способности соединений ингибировать фермент DPP-4................ 56
2.4.3 Изучение соединений на клеточной культуре HepG2..................................... 57
2.5 Определение острой токсичности ....................................................................... 58
2.6 Статистическая обработка данных...................................................................... 58
ГЛАВА 3 РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕИЕ.............................................................. 60
3.1 Скрининг структурных аналогов соединения QS-528 ....................................... 60
3.2 Изучение дозозависимого гипогликемического действия соединений QS-528 и
QS-619......................................................................................................................... 61
3.3 Изучение гипогликемического действия соединений QS-528 и QS-619 на
генетически обусловленной модели СД2 ................................................................. 64
3.3.1 ОГТТ на мышах линии C57Bl/6J A
y
/a............................................................... 65
3.3.2 Биохимическое исследование крови ............................................................... 67
3.3.3 Гистологическое исследование печени............................................................ 68
3.3.4 Морфометрическое исследование печени ....................................................... 72
3.4 Изучение гипогликемического действия соединений QS-528 и QS-619 на диетиндуцированной модели СД2.................................................................................... 74
3.4.1 ОГТТ на мышах линии C57Bl/6J A
y
/a............................................................... 74
3.4.2 Биохимическое исследование крови ................................................................ 77
3.4.3 Гистологическое исследование печени............................................................ 79
3.5 Изучение механизма действия соединений QS-528 и QS-619........................... 83
3.5.1 Определение способности соединения QS-619 активировать FFAR1............... 83
3.5.2 Определение способности соединений QS-528 и QS-619 ингибировать
фермент DPP-4 ........................................................................................................... 83
3.5.3 Определение концентрации инсулина и GIP................................................... 84
4
3.6 Исследование острой токсичности...................................................................... 87
3.7 Изучение гепатопротекторного действия соединения QS-528 на тетрахлорметан
– индуцированной модели гепатотоксичности ........................................................ 88
3.7.1 Биохимическое исследование крови ................................................................ 89
3.7.2 Гистологическое исследование печени............................................................ 90
3.7.3 Морфометрическое исследование печени ....................................................... 96
3.8 Изучение соединений QS-528 и QS-619 на клетках линии HepG2.................. 100
ЗАКЛЮЧЕНИЕ........................................................................................................ 104
ВЫВОДЫ ................................................................................................................. 109
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ...................................................................................... 110
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ........................................................................................ 113
