Введение
Глава 1. Обзор литературы 13
1.1. Формирование мезодермальных производных в индивидуальном и историческом развитии 14
1.1.1. Зародышевые листки и гаструляция 14
1.1.2. Появление мезодермы в ходе эволюции 16
1.1.3. Молекулярные механизмы миогенной дифференцировки 20
1.1.4. bHLH транскрипционный фактор Twist 25
1.1.5. Гомеодоменный транскрипционный фактор Mox 39
1.2. Развитие мезодермы у Spiralia 45
1.2.1. Клеточные линии и морфогенез мезодермы 45
1.2.2. Соматобласт 4d и организатор у Spiralia 50
1.2.3. Экспрессия молекулярно-генетических маркеров – возможных детерминантов развития мезодермы аннелид и моллюсков 53
1.3. Краткий обзор развития полихет как модельных объектов 59
Глава 2. Материалы и методы 68
2.1. Использованная техника и материалы 68
2.2. Манипуляции с живыми объектами 70
2.3. Молекулярно-биологические методы 71
2.4. Анализ локализации белков и нуклеиновых кислот 87
Глава 3. Результаты 91
3.1. Анализ структурно-функциональной организации и экспрессии генов интереса 91
3.1.1. Twist 93
3.1.2. Mox 100
3.1.3. Evx 102
3.1.4. Vasa и PL10 106
3.1.5. Piwi 111
3.2. Разработка генетических методов прижизненного и функционального анализа 114
3.2.1. Трансгенез на основе транспозона Mos1 114
3.2.2. Трансгенез на основе рекомбинантной BAC 118
3.2.3. Мутагенез с помощью нуклеаз TALEN 122
3.3. Активность MAP-киназного сигналинга в эмбриогенезе 127
3.3.1. Выявление компонентов каскада MAP-киназ 127
3.3.2. Ингибиторный анализ 131
Глава 4. Обсуждение результатов 135
4.1. Молекулярные регуляторы развития мезодермы нереид и используемые методические подходы для их анализа 135
4.2. Ранняя экспрессия Twist в мезодермальных бластомерах 139
4.3. Молекулярное паттернирование мезодермы в ходе ларвального развития 142
4.4. Роль МАР-киназного сигналинга в формировании мезодермы 152
Выводы 158
Благодарности 159
Литература 161
