Введение
Глава 1. Обзор литературы 22
1.1. Актуальность 22
1.2. Особенности репаративного остеогенеза при использовании ординарных и активированных остеопластических материалов
1.2.1. Тканеинженерные остеопластические материалы и их влияние на репаративный остеогенез 35
1.2.2. Остеопластические материалы с факторами роста и их влияние на репаративный остеогенез .47
1.2.3. Ген-активированные остеопластические материалы и их влияние на репаративный остеогенез 50
1.3. Заключение 59
ГЛАВА 2. Материалы и методы исследования .60
2.1. Дизайн исследования 60
2.2. Создание прототипов ген-активированных остеопластических материалов .60
2.2.1. Характеристика генной конструкции .60
2.2.2. Характеристика матриксов-носителей 61
2.2.3. Совмещение матриксов-носителей и генных конструкций 62
2.3. Методы оценки цитотоксичности, пролиферативной активности, экспрессии мРНК гена VEGFA, продукции белка VEGF ММСК in vitro под влиянием разработанных ген-активированных остеопластических материалов .64
2.3.1. Получение культур ММСК человека .64
2.3.2. Оценка цитотоксичности ген-активированных остеопластических материалов 65
2.3.3. Оценка пролиферативной активности клеток под влиянием ген-активированных остеопластических материалов 67
2.3.4. Определение продукции мРНК гена VEGFA культурами ММСК 67
2.3.5. Определение продукции белка VEGF-A165 культурами ММСК .70
2.4. Анализ ген-активированных остеопластических материалов in vivo .72
2.4.1. Имплантация ген-активрованных остеопластических материалов в краниальные дефекты кроликам 72
2.4.2. Конусно-лучевая компьютерная томография .74
2.4.3. Гистологическое и гистоморфометрическое исследования .75
2.5. Статистический анализ 78
ГЛАВА 3. Результаты лабораторного этапа исследования и их обсуждение 82
3.1. Выбор матриксов-носителей для создания ген-активированных остеопластических материалов .82
3.2. Цитотоксичность и влияние ген-активированных остеопластических материалов на пролиферативную активность клеток 84
3.3. Специфическая активность разработанных ген-активированных остеопластических материалов in vitro 91
3.4. Обсуждение результатов лабораторного этапа исследований 99
ГЛАВА 4. Результаты экспериментального исследования in vivo и их обсуждение 102
4.1. Специфическая активность плазмидной ДНК с геном VEGFA при ортотопической имплантации ген-активированных остеопластических материалов .102
4.2. Особенности влияния ген-активированных остеопластических материалов на репаративный остеогенез и их эффективность в замещении костных дефектов..
4.2.1. Результаты конусно-лучевой компьютерной томографии 109
4.2.2. Результаты гистологического анализа
4.3. Рекомендации к проведению клинических исследований ген-активированных остеопластических материалов .136
4.4. Обсуждение результатов экспериментальных исследований in vivo .138
Заключение 147
Выводы .153
Практические рекомендации .154
Приложения №1-4 .156
Список литературы
